针对干扰素-γ的新型核酸适配体的筛选及鉴定

发布时间：2017-09-18 02:11

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【摘要】：目的研发能特异性结合干扰素-γ(IFN-γ)的DNA适配体,为发展IFN-γ的新型检测技术提供基础。方法体外合成全长为59个碱基并含有21个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以IFN-γ蛋白为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从单链DNA文库中筛选能够选择性结合IFN-γ蛋白的核酸适配体;流式细胞术检测富集进度、适配体与IFN-γ蛋白结合特性;MFold软件预测二级结构。结果经多轮筛选获得了能够识别IFN-γ蛋白的DNA适配体B3-8,其能够选择性地结合IFN-γ蛋白,而与血清白蛋白的结合较弱。经检测其Kd值为185 nmol/L。结论 DNA适配体B3-8能选择性地识别IFN-γ蛋白,在研发针对IFN-γ的新型检测技术方面具有应用潜能。
【作者单位】： 中国医学科学院基础医学研究所;国家纳米科学中心;南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室;
【关键词】： 适配体 SELEX IFN-γ
【基金】：国家自然科学基金(81071870) 科技部重大科学计划(2011CB933504)
【分类号】：R341
【正文快照】： 核酸适配体(Aptamer)是一类经筛选得到的能结合蛋白、细胞或其他小分子物质的单链或双链寡核苷酸[1-5],它们自身所形成的空间三维结构能以较高的亲和力特异性地与靶分子结合[6]。另外,核酸适配体还具有易于体外合成、易修饰、免疫原性低、价格低廉等优点,使其成为一类较为适

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本文编号：872753