单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白基因腺病毒载体构建及其在体内外表达效力检测

发布时间：2017-09-19 00:14

  本文关键词：单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白基因腺病毒载体构建及其在体内外表达效力检测

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【摘要】：目的:构建携带小鼠源性单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白(mSIGIRR)基因重组腺病毒并对其体内外表达效力进行检测。方法:构建重组穿梭质粒pDC316-mSIGIRR,行酶切、测序鉴定。将穿梭质粒和骨架质粒共转293细胞,包装重组腺病毒Ad.mSIGIRR,行PCR及滴度鉴定。Ad.mSIGIRR感染A549细胞及小鼠肺组织后,通过RT-PCR、Western blot、免疫组化检测mSIGIRR表达情况。结果:扩增得到目的基因片段与Genbank中序列一致,获得表达mSIGIRR蛋白的重组腺病毒。病毒感染滴度为4×109pfu/mL,在体内外感染模型中均有较高表达效力。结论:成功构建携带mSIGIRR基因重组腺病毒,为进一步研究SIGIRR在炎症调控中的作用及分子机制奠定基础。
【作者单位】： 中国人民解放军海军总医院呼吸内科;第三军医大学新桥医院呼吸内科;
【关键词】： 单免疫球蛋白白介素-受体相关蛋白 腺病毒载体 急性肺损伤 Toll样受体
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:30600272)
【分类号】：R346
【正文快照】： Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)信号通路的活化在全身性炎症反应中起着重要作用[1],过度的TLR应答可导致炎症反应瀑布式爆发[2]。研究[3]表明,单免疫球蛋白白介素-1受体相关蛋白(single immunoglobin IL-1 receptor related protein,SIGIRR)是TLR/IL-1R信号通路中的负

【共引文献】

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本文编号：878354