幽门螺杆菌热休克蛋白A核酸疫苗的构建

发布时间：2017-09-20 01:05

  本文关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白A核酸疫苗的构建

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【摘要】：目的构建幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)亚单位核酸疫苗,为进一步研制Hp核酸多价疫苗提供技术平台。方法以PMD-HspA为模板,扩增、纯化Hp hspA基因,插入到真核表达载体PcDNA3中,转化大肠埃希菌DH5a,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,得到重组核酸疫苗pcDNA3-HspA,用特异性PCR方法和小提质粒酶切电泳鉴定重组质粒,同时将pcDNA3-HspA进行测序,进一步确定是否构建成功及鉴定构建过程中是否发生基因突变。结果 PCR鉴定结果显示,扩增产物为0.36kb的目的基因;酶切鉴定结果显示,得到5.45kb克隆载体片段和0.36kb的目的基因片段;重组质粒pcDNA3-HspA测序,得到基因全长357bp目的基因片段,与克隆质粒测序图比较,无基因变异。结论成功构建了Hp单价核酸疫苗pcDNA3-HspA,为研制Hp核酸多价疫苗奠定基础。
【作者单位】： 新乡医学院医学检验系;新乡医学院第一附属医院检验科;新乡医学院第三附属医院检验科;
【关键词】： 幽门螺杆菌 核酸疫苗 hspA基因
【基金】：河南省科技攻关计划项目(102102310154) 河南省高校科技创新人才项目(2012HASTIT024) 河南省高校青年教师骨干项目(2010GGJS-117) 河南省教育厅科学技术研究重点项目(12A320017)
【分类号】：R392
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Hp)是目前发现惟一的能够在人体胃内定植、生存的细菌,在临床主要应用抗菌药物加质子泵抑制剂或铋盐的三联疗法治疗Hp感染,但是存在治疗周期长、易复发、患者的依从性差等诸多缺点。热休克蛋白(Hsp)A亚单位作为Hsp的主要功能单位,与尿素酶、VacA蛋白及过氧化物酶

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 刘志杰;邱宏;周秀萍;李秀萍;;幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定[J];实用预防医学;2011年09期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 姜茵;奚悦;王小平;何殿殿;李妍;;幽门螺杆菌Lpp20融合蛋白的表达、标签切除及鉴定[J];生物技术;2011年04期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘秀丽,李淑琴,刘纯杰,陶好霞,李R，

本文编号：884975