类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染RAW264.7细胞模型的建立

发布时间：2017-09-20 05:39

  本文关键词：类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染RAW264.7细胞模型的建立

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【摘要】：目的建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法摸索类鼻疽伯克霍尔德氏菌培养条件、构建模型的感染条件(e.g.感染复数,感染时间),通过吉姆萨染色、透射电镜、活细胞工作站动态观察等确证胞内感染和宿主细胞的形态变化,分析病原菌侵袭率、胞内复制率和宿主反应性来评价该模型中病原菌侵入RAW264.7特点和病理损伤类型。结果确定了类鼻疽伯克霍尔德氏菌的一般培养条件,感染复数MOI=100感染宿主细胞,170g离心5min后37℃共孵1h以利于细菌侵入胞内,含250μg/ml卡那霉素的DMEM-10培养以杀死胞外病原菌。形态观察,类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染后最早8h可观察到异物多核巨细胞(MNGC),RAW264.7细胞伸出伪足,相互融合。感染初期(3h)TNF-α升高较快,9h后则下降至低值,直至感染后期(15～24h)再次升高。结论成功构建类鼻疽伯克霍尔德氏菌胞内感染模型,拟为进一步研究其致病机制提供了条件。
【作者单位】： 第三军医大学医学检验系临床微生物教研室;第三军医大学医学检验系临床血液教研室;
【关键词】： 类鼻疽伯克霍尔德氏菌 小鼠巨噬细胞(RAW.) 细胞模型
【分类号】：S852.61;R378
【正文快照】： 类鼻疽伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pseud-omallei)又称类鼻疽杆菌,属于假单胞菌属,2006年被美国CDC列为B类生物恐怖剂。它能感染机体几乎任何器官,导致的疾病称类鼻疽,是一种典型的热带疾病,有很高的误诊和死亡率,是一种正在扩散的人兽共患病[1-2]。急性感染主要表现为急性

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本文编号：886252