胎儿骨髓MSCs中Bmi-1和p16基因表达与其复制老化的关系

发布时间：2017-09-20 15:45

  本文关键词：胎儿骨髓MSCs中Bmi-1和p16基因表达与其复制老化的关系

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【摘要】：目的:探讨胎儿骨髓间充质干细胞(MSCs)中Bmi-1和p16基因表达随传代次数增加的变化情况,阐明其与MSCs复制老化之间的关系。方法:取孕16、17和25周流产胎儿的股骨,利用贴壁培养法分离、培养、扩增骨髓MSCs。采用流式细胞术检测第5代MSCs中CD13、CD34、CD44、CD45、CD73、CD90、CD105、CD133和HLA-DR的表达;连续传代30代,诱导培养MSCs老化;用BrdU掺入率检测第5(P5)、15(P15)和30代(P30)骨髓MSCs的增殖能力;采用Real-time PCR法检测上述细胞中Bmi-1和p16基因mRNA的表达量。结果:从孕16、17和25周的流产胎儿股骨骨髓中均能分离、培养、扩增出MSCs,均表达CD13、CD44、CD73、CD90和CD105,不表达CD34、CD45、CD133和HLA-DR;随着MSCs的不断传代,细胞生长速度逐渐减慢,细胞变成扁平状,折光性下降。P5与P15MSCs的BrdU掺入率比较差异无统计学意义(P0.05),P30与P5和P15MSCs的BrdU掺入率比较均明显降低(P0.05)。P5MSCs中Bmi-1mRNA表达水平高于P15和P30MSCs(P0.05),P15MSCs中Bmi-1mRNA表达水平高于P30MSCs(P0.05)。P5与P15 MSCs中p16mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P0.05),但P30 MSCs中p16mRNA表达水平明显低于P5和P15MSCs(P0.05)。结论:胎儿股骨骨髓能培养出MSCs,其复制老化与Bmi-1的表达有关联,但其信号通路可能不通过p16INK4a-Rb介导。
【作者单位】： 扬州大学临床医学院神经内科;首都医科大学宣武医院细胞生物室;
【关键词】： Bmi-基因 p基因 骨髓间充质干细胞 老化
【基金】：江苏省卫生厅科研基金资助课题(H201049)
【分类号】：R329.1
【正文快照】： 原癌基因Bmi-1是聚硫蛋白(polycomb groupgenes,PcG)家族重要的调节基因,在调节造血干细胞、神经干细胞、肿瘤干细胞的自我更新和老化过程中起重要作用[1-4]。PcG作为上游调控基因,主要作用于下游的INK4a/ARF基因位点,通过p16INK4a-Rb和ARF-p53通路影响细胞增殖和衰老[5-8]。

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘娜;李文磊;贾鹏;朱东亚;叶民;丁新生;;Bmi-1基因表达与人骨髓间充质干细胞增殖关系的探讨[J];南京医科大学学报(自然科学版);2008年06期

2 王芳;王e，

本文编号：888939