小鼠诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的实验研究

发布时间：2017-09-22 10:17

  本文关键词：小鼠诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的实验研究

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【摘要】：观察血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和维生素C对小鼠诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)体外分化为心肌细胞的诱导作用。采用直接悬浮培养法使iPSCs形成拟胚体(embryoid bodies,EBs),分别以VEGF和维生素C作为诱导剂,自然分化作为阴性对照组,加入1%二甲亚砜诱导剂为阳性对照组。倒置显微镜下观察细胞生长情况,记录跳动的拟胚体出现的时间和数目,计算心肌细胞分化率,细胞免疫荧光检测心肌特异性蛋白cTnT的表达,RT-PCR检测心肌特异性基因β-MHC mRNA的表达。在LIF条件下,iPSCs在饲养层上成集落状生长;未分化的iPSCs中Oct-4及AKP呈阳性表达;与自然分化组相比,二甲亚砜、VEGF和维生素C均能提高iPSCs的心肌细胞分化效率(P0.05);分化的心肌细胞可自发搏动,同时分化细胞中表达心肌特异性蛋白cTnT以及心肌特异性基因β-MHC。VEGF和维生素C可以促进iPSCs向心肌细胞分化。
【作者单位】： 南充市中心医院心内科;川北医学院第二临床医学院;重庆市神经病学重点实验室;
【关键词】： 诱导多能干细胞 血管内皮细胞生长因子 维生素C 诱导分化 心肌细胞
【基金】：重庆市卫生局医学科学技术研究重点项目(批准号:2009-1-51)资助的课题~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 干细胞能分化为心肌细胞,但存在一些难解决的问题。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)容易获得、容易体外增殖扩增,但目前还没有直接的证据显示MSCs可以分化为具有完整功能的心肌细胞,仅仅是心肌样细胞[1]。胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)具有全能分化性

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