含串联多拷贝DNA序列的质粒载体的构建

发布时间：2017-09-28 16:00

  本文关键词：含串联多拷贝DNA序列的质粒载体的构建

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【摘要】：目的探索简便快速的构建含有串联多拷贝DNA序列的质粒载体的方法。方法通过PCR的方法获得不同拷贝数的DNA序列的片段,以与载体同源重组的方式将PCR片段与载体重组,得到重组质粒。最后经BamHⅠ和NotⅠ双酶切鉴定来确定所构建质粒中插入重复DNA序列的拷贝数。结果经酶切鉴定分析,所得质粒分别可以切出不同大小的片段,而且片段大小与所插入的重复DNA序列拷贝数是相对应的。结论成功构建了含有串联多拷贝DNA序列的质粒载体,为向质粒载体中插入多拷贝DNA序列提供了简便实用的新方法。
【作者单位】： 天津医科大学附属肿瘤医院乳腺一科、乳腺癌防治教育部重点实验室、天津市"肿瘤防治"重点实验室;
【关键词】： DNA 重组 克隆 分子 质粒 聚合酶链反应 串联多拷贝DNA序列
【分类号】：R346
【正文快照】： 串联多拷贝DNA序列质粒载体的构建在某些蛋白生物学功能的研究中是必须的,如对一些转录因子或者RNA结合蛋白的研究。为了增强目的蛋白与其靶序列的亲和力,往往会在质粒载体中插入多个拷贝的结合位点。对于一些较短的结合序列,首选的方法是通过直接合成得到所需要的多拷贝序列

【参考文献】

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本文编号：936730