重金属铅免疫复合物的制备与鉴定

发布时间：2017-09-30 05:00

  本文关键词：重金属铅免疫复合物的制备与鉴定

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【摘要】：目的制备Pb-DTPA-BSA复合物,作为完全抗原,用以免疫动物制备铅抗体。方法首先用金属螯合剂二乙基三胺五乙酸(Diethylene triamine pentacetate,DTPA)与铅离子(Pb2+)结合,再分别用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)、戊二醛、三乙胺作偶联剂将其与大分子载体蛋白-牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)偶联,制备Pb-DTPA-BSA复合物。将复合物做聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Time of Flight mass Spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定并免疫小鼠,获得抗PbDTPA抗体。结果 SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS结果均验证合成了复合物Pb-DTPA-BSA,平均分子量76435;Pb-DTPA与BSA的偶联比为11∶1。免疫小鼠后,小鼠血清中产生了抗Pb-DTPA抗体,抗体最高效价达到1.0×105。结论经分析证明成功合成了免疫复合物Pb-DTPA-BSA,可用于重金属Pb抗体的制备。
【作者单位】： 天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室 军事医学科学院卫生学环境医学研究所;
【关键词】： 重金属 铅 免疫复合物 制备与鉴定
【基金】：国家高技术研究发展计划(2013AA065601,2010AA06Z302) 国土资源部公益性行业科研专项(201211056)
【分类号】：R392
【正文快照】： 由于工业三废及汽车尾气的排放,环境中重金属污染越来越严重,空气、土壤、水、食品以及中草药中重金属污染日益受到重视。重金属离子自身带有电荷,趋向于与生物分子发生强烈的不可逆的反应,这也是重金属的毒性所在。重金属自身不能作为有效的抗体识别目标,利用选择性螯合剂与

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

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【共引文献】

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2 杨凤丽;朱晓霞;胡白石;徐丽娜;娄e，

本文编号：946234