利用亲水富集策略分析人血浆中N-糖基化蛋白及N-糖类型
本文关键词:利用亲水富集策略分析人血浆中N-糖基化蛋白及N-糖类型
更多相关文章: 超滤辅助样品制备 亲水相互作用色谱 反相色谱 N-糖基化蛋白 N-糖
【摘要】:蛋白质的N-糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多已知的血浆肿瘤诊断标志物及治疗靶标都是N-糖基化蛋白。针对血浆的糖蛋白质组研究有利于发现新的蛋白标志物。然而,血浆蛋白质浓度分布的动态范围非常宽,且同一位点上的糖链存在微观不均一性,影响了血浆中糖蛋白的鉴定效率。本文利用亲水材料ZIC-HILIC制备亲水富集柱分别对人血浆中的N-糖链和N-糖肽进行富集,并结合碱性反相色谱进行肽段的预分离和高准确度质谱分析,最终在健康人的血浆中鉴定到了299个糖基化蛋白、637个糖基化位点,并识别出31种不同的糖型。在这些鉴定到的糖基化位点中,新发现有107个N-糖基化位点(占总位点数的16.8%)。本方法操作简单,可以有效富集N-糖肽和N-糖,为在血浆中寻找糖蛋白和糖链生物标志物提供了可靠的手段。
【作者单位】: 北京理工大学生命学院;蛋白质组学国家重点实验室 北京蛋白质组研究中心 军事医学科学院放射与辐射医学研究所;新加坡南洋理工大学生命学院;
【关键词】: 超滤辅助样品制备 亲水相互作用色谱 反相色谱 N-糖基化蛋白 N-糖
【基金】:国家重点基础研究“973”项目(2011CB910603) 国家高技术研究发展计划项目(2012AA020203) 北京市科技新星计划项目(Z121107002512014)
【分类号】:R341;O657.72
【正文快照】: 蛋白质糖基化是最重要的翻译后修饰之一,许多蛋白质功能的实现都与糖基化修饰密切相关。糖基化对于蛋白质的折叠、运输、定位起着重要作用,并参与受体激活、信号转导等诸多重要的生物进程[1]。在临床诊断中,许多诊断标志物及治疗的靶标都是糖蛋白[2-4]。因此,系统分析血液中
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