体外电刺激对维生素C诱导的多能干细胞向心肌细胞分化的影响

发布时间：2017-10-09 03:20

  本文关键词：体外电刺激对维生素C诱导的多能干细胞向心肌细胞分化的影响

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【摘要】：目的探讨电刺激在体外对诱导性多能干细胞(iPSCs)向心肌细胞分化的作用。方法复苏小鼠来源的iPSCs,悬滴培养法形成拟胚体,维生素C诱导其分化,诱导过程按是否给予电刺激分为电刺激组与非电刺激组。观察各组细胞生长情况,记录各组拟胚体出现跳动的时间和跳动拟胚体的数量,计算心肌细胞分化率。共聚焦显微镜成像结合免疫荧光细胞化学检测心肌特异性肌钙蛋白T(c-TnT)的表达。RT-PCR检测干细胞多能性标志因子Oct-4、心肌早期特异性转录因子GATA-4和心肌特异性肌球蛋白α重链(α-MHC)的基因表达。结果电刺激组拟胚体较非电刺激组分化更快,更早出现搏动,心肌细胞分化率更高[(68.89±5.09)%vs(52.22±3.85)%,P0.05]。两组搏动区域细胞均表达c-TnT,电刺激组细胞c-TnT表达更明显。在诱导过程中,Oct-4表达水平随诱导时间延长逐渐减少,电刺激组较非电刺激组递减更快(P0.05)。两组均检测到心肌特异性标记分子GATA-4和α-MHC的表达。在诱导分化相同时间点,电刺激组GATA-4和α-MHC表达水平高于非电刺激组(P0.05)。结论模拟心脏电学微环境的电刺激有助于维生素C诱导的iPSCs在体外向具有心肌细胞表型特征的细胞分化。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院心内科;
【关键词】： 电刺激 诱导多能干细胞 心肌细胞 分化
【基金】：重庆市卫生局医学科学技术研究重点项目(2009-1-51)
【分类号】：R329
【正文快照】： 通过导入特定的转录因子使体细胞重编程获得的诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)可能为疾病提供“个体特异的”或“疾病特异的”细胞来源,避免干细胞研究领域的免疫排斥和伦理道德问题[1-3]。研究证明,iPSCs在体外能自发向心肌细胞分化,但其自然分化效

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