天麻素对PTSD和MCAO模型的药效学研究

发布时间：2017-10-17 14:44

  本文关键词：天麻素对PTSD和MCAO模型的药效学研究

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【摘要】：研究目的探讨天麻素(gastrodin,GAS)对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)模型大鼠行为学及海马促炎症因子水平的影响;探讨天麻素对大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型小鼠纹状体髓鞘的保护作用及白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)水平的影响。研究方法本研究分为两部分。实验一:观察天麻素对创伤后应激障碍模型大鼠焦虑样行为、海马促炎性因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、诱生型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,i NOS)、p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38丝裂原激活蛋白激酶(phosphorylated p38mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK)水平的影响。将大鼠随机分为对照(Sham)组、模型(enhanced single prolonged stress,ESPS)组、模型+低剂量天麻素(GAS(L))组、模型+中剂量天麻素(GAS(M))组、模型+高剂量天麻素(GAS(H))组。Sham组大鼠正常饲养;其余各组进行ESPS造模。造模结束后,Sham组和模型组腹腔注射生理盐水,GAS(L)组、GAS(M)组、GAS(H)组分别接受不同剂量天麻素(50、100、200 mg/kg)干预,连续14 d。观察指标包括:1.行为学观察包括旷场实验、高架十字迷宫实验;2.采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-6、IL-1β水平;3.采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot,WB)检测i NOS、p38、p-p38蛋白表达情况。实验二:观察天麻素对MCAO模型小鼠神经功能的保护作用及纹状体髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、高分子量神经丝蛋白(neurofilament high molecular weight,NF-H)和缺血半脑内IL-1β水平的影响。将小鼠随机分为对照(Sham)组、模型(MCAO)组、天麻素(GAS)组。Sham组小鼠接受假手术干预,其余各组接受MCAO造模,造模结束后,Sham组和MCAO组小鼠腹腔注射生理盐水,GAS组小鼠接受天麻素(100mg/kg)干预,连续7 d。观察指标包括:1.行为学观察包括神经功能评分;2.2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色;3.采用ELISA方法检测缺血侧半脑IL-1β水平;4.采用免疫组织化学染色方法观察纹状体内MBP和NF-H表达情况。结果实验大鼠经ESPS处理后出现焦虑样行为表现,IL-6、IL-1β水平增加,iNOS、p-p38表达增加,p-p38/p38比值增加;经不同剂量天麻素干预,特别是高剂量天麻素干预后,上述情况得到改善。实验小鼠经MCAO处理后出现缺血性脑卒中样行为表现,神经功能评分减低,脑梗死容积增加,MBP和NF-H积分光密度减低,IL-1β水平增高,给与天麻素干预后,上述情况得到改善。具体如下:实验一1.与Sham组比较,ESPS处理后大鼠进入中央区次数和进入中央区时间百分比减少(P0.01,P0.05);进入开臂探索次数和进入开臂探索时间百分比减少(P0.05,P0.01);海马IL-6、IL-1β水平增加(P0.01,P0.01);海马i NOS/β-actin比值、p-p38/β-actin比值增加(P0.01,P0.05);海马p-p38/p38比值增加(P0.01),差异具有统计学意义。2.与ESPS组比较,GAS(M)组在进入中心区探索时间百分比增加(P0.05);进入开臂探索次数增加(P0.01);进入开臂探索时间百分比增加(P0.01);i NOS/β-actin的比值减少(P0.05);p-p38/p38比值减少(P0.05),差异具有统计学意义。3.与ESPS组比较,GAS(H)组在进入中央区次数增加(P0.01);进入中央区时间百分比增加(P0.05);进入开臂探索次数增加(P0.01);进入开臂探索时间百分比增加(P0.01);海马IL-6、IL-1β水平减低(P0.05,P0.05);i NOS/β-actin的比值减少(P0.01);p-p38/p38比值减少(P0.05),差异具有统计学意义。实验二1.Sham组神经功能评分及脑梗死容积均为0,与MCAO组相比,GAS组神经功能评分显著减低(P0.05),GAS组脑梗死容积明显减少(P0.05),差异具有统计学意义。2.与Sham组相比,MCAO组MBP和NF-H染色的积分光密度显著减低(P0.05),IL-1β水平增高(P0.05),差异具有统计学意义。3.与MACO组比较,GAS组MBP和NF-H染色的积分光密度显著增加(P0.05),IL-1β水平减低(P0.05),差异具有统计学意义。结论天麻素能改善ESPS模型大鼠的焦虑样行为,减少大鼠海马IL-1和IL-1β水平,其可能是通过i NOS/p38信号通路而发挥效应的;同时天麻素可以改善MCAO模型小鼠神经功能损伤,抑制IL-1β水平,并对纹状体髓鞘和神经纤维具有保护作用。
【关键词】：天麻素 创伤后应激障碍 脑缺血再灌注损伤
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.5
【目录】：

• 缩略语表5-9
• 中文摘要9-12
• 英文摘要12-16
• 前言16-18
• 文献回顾18-28
• 1 炎症系统简介18-21
• 1.1 致炎因子18
• 1.2 细胞因子18-19
• 1.3 炎症信号通路19-21
• 2 中枢神经系统与炎症21-22
• 3 炎症在神经精神疾病中的作用22-25
• 3.1 炎症与抑郁症22-23
• 3.2 炎症与创伤后应激障碍23-24
• 3.3 炎症与脑卒中24
• 3.4 炎症与其他神经精神疾病24-25
• 4 天麻素的药效学作用25-26
• 5 天麻素在神经精神疾病中的作用26-28
• 实验一 天麻素对PTSD模型大鼠行为学及海马促炎症因子水平的影响28-45
• 1 材料28-31
• 2 方法31-36
• 3 结果36-41
• 4 讨论41-45
• 实验二 天麻素对脑缺血再灌注模型小鼠大脑及纹状体髓鞘的保护作用及缺血半脑IL-1Β水平的影响45-57
• 1 材料45-46
• 2 方法46-49
• 3 结果49-53
• 4 讨论53-57
• 小结57-58
• 参考文献58-72
• 个人简历和研究成果72-73
• 致谢73

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本文编号：1049421