雄激素对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体亚单位的影响

发布时间：2017-10-18 22:47

  本文关键词：雄激素对SAMP8小鼠海马神经元NMDA受体亚单位的影响

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【摘要】：目的:研究对象为SAMP8小鼠,观察SAMP8小鼠去势后以及去势后通过补充治疗睾酮和双氢睾酮对海马神经元N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体亚单位NR1、NR2A和NR2B的影响,进而探究其发生机制,为研究与雄激素相关的神经退行性疾病提供实验性依据。方法:选用40只6月龄SAMP8雄性小鼠,随机分入4个实验组,每一个实验组入选10只,分别为小鼠假手术组(P8组)、小鼠去势组(Cast组)、小鼠去势后补充治疗睾酮组(T组)、小鼠去势后补充治疗双氢睾酮组(DHT组)。小鼠同源对照组(R1组)选用10只6月龄SAMR1雄性小鼠。Cast组、T组以及DHT组三组一共30只小鼠全部切除睾丸(即去势术)。T组和DHT组于去势后3天,分别腹腔注射睾酮5mg/(kg.day)和双氢睾酮1mg/(kg.day),其余各实验组注射相同量玉米油溶液,每日注射1次,连续注射21日。免疫组织化学染色:R1组、P8组、Cast组、T组以及DHT组,每实验组各取5只小鼠,充分暴露小鼠心脏,灌注后取小鼠海马组织,制备成石蜡切片,用于抗NR1、NR2A、NR2B免疫组织化学染色,测量5个实验组小鼠海马CA1区的平均光密度。蛋白免疫印迹:R1组、P8组、Cast组、T组以及DHT组,每实验组各取5只小鼠,麻醉后断头取脑,提取海马组织蛋白,测定蛋白质浓度,对组织蛋白进行变性。SDS-聚丙酰胺凝胶电泳,转膜后进行免疫反应。以β-actin的表达为内参,测定各实验组蛋白相对表达水平。结果:1免疫组织化学染色结果抗NR1免疫组织化学染色结果:Cast组阳性神经元的平均光密度值(0.053±0.012)明显低于R1组(0.272±0.015)、T组(0.193±0.009)和DHT组(0.197±0.011)(P0.05),P8组(0.186±0.013)与T组和DHT组比较无明显差异(P0.05);抗NR2A免疫组织化学染色结果:Cast组阳性神经元的平均光密度值(0.014±0.002)明显低于R1组(0.054±0.009)、T组(0.046±0.007)和DHT组(0.034±0.011)(P0.05),P8组(0.044±0.007)与T组和DHT组比较无明显差异(P0.05);抗NR2B免疫组织化学染色结果:Cast组阳性神经元的平均光密度值(0.058±0.006)明显低于R1组(0.104±0.008)、T组(0.077±0.004)和DHT组(0.084±0.007)(P0.05),P8组(0.087±0.007)与T组和DHT组比较无明显差异(P0.05);2蛋白免疫印迹结果NR1蛋白免疫印迹结果:R1组海马中NR1受体OD值为0.88±0.05,明显高于其它实验组(P0.05)。Cast组海马中NR1表达值为0.28±0.05,明显低于其他组(P0.05)。P8组OD值为0.71±0.06。T组和DHT组OD值分别为0.63±0.05和0.66±0.04,明显高于Cast组(P0.05);NR2A蛋白免疫印迹结果:R1组海马中受体OD值为0.76±0.02,明显高于其它实验组(P0.05)。Cast组海马中NR2A表达OD值为0.23±0.02,明显低于其他组(P0.05)。P8组OD值为0.63±0.05。T组和DHT组OD值分别为0.60±0.06和0.59±0.07,明显高于Cast组(P0.05);NR2B蛋白免疫印迹结果:R1组海马中NR2B受体OD值为0.66±0.03,明显高于其它实验组(P0.05)。Cast组海马中NR2B表达OD值为0.21±0.02,明显低于其他组(P0.05)。P8组OD值为0.52±0.01。T组和DHT组OD值分别为0.53±0.03和0.52±0.04,明显高于Cast组(P0.05)。结论:1 SAMP8小鼠去势后,海马NMDA受体亚单位NR1、NR2A以及NR2B蛋白含量显著减少。2补充治疗雄激素后,能够增加海马NMDA受体亚单位NR1、NR2A以及NR2B的蛋白含量。
【关键词】：SAMP8小鼠 海马 CA1区 N-甲基-D-门冬氨酸受体 去势 睾酮 双氢睾酮
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-21
• 结果21-23
• 附图23-35
• 附表35-38
• 讨论38-42
• 结论42-43
• 参考文献43-48
• 综述 雄激素对海马神经元NMDA受体亚单位的影响48-59
• 参考文献53-59
• 致谢59-60
• 个人简历60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

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本文编号：1057606