丁苯酞对阿尔茨海默病大鼠海马细胞凋亡的作用研究

发布时间：2017-11-03 12:18

  本文关键词：丁苯酞对阿尔茨海默病大鼠海马细胞凋亡的作用研究

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【摘要】：目的:采用腹腔注射D-半乳糖和灌胃三氯化铝的方法复制阿尔茨海默病(AD)大鼠动物模型,观察丁苯酞对AD大鼠行为学、氧化应激、胆碱能神经系统、脑病理组织学的作用,系统评价丁苯酞对AD大鼠的作用,并进一步研究丁苯酞对AD大鼠海马组织细胞凋亡率、Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的作用,初步探讨其作用机制。方法:1模型制备大鼠每天腹腔注射60 mg·kg-1 D-半乳糖和灌胃给予5mg·kg-1三氯化铝(AlCl_3),连续90d。2动物分组与给药60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(Control)、模型组(Model)、丁苯酞低剂量组(NBP-L):25 mg?kg-1、丁苯酞中剂量组(NBP-M):50 mg?kg-1、丁苯酞高剂量组(NBP-H):100mg?kg-1。每组12只,按照大鼠体重10ml/kg体积连续灌胃给药90 d。丁苯酞干预组上午灌胃给药,下午给予D-半乳糖和AlCl_3;模型组上午灌胃纯水,下午给予D-半乳糖和AlCl_3;对照组上午下午均给予同体积的纯水或生理盐水。3观察指标与检测方法3.1 Morris水迷宫实验评价大鼠学习、记忆能力:定位航行试验观察大鼠总路程和逃避潜伏期;空间探索试验观察大鼠穿过平台位置的次数和停留时间。3.2血液生化指标检测评价大鼠氧化应激能力:大鼠取血,离心后,比色法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。3.3组织生化指标检测评价大鼠胆碱能神经系统功能:大鼠取海马组织,匀浆离心后,比色法测定海马组织乙酰胆碱酯酶(ACHE)和乙酰胆碱转移酶(CHAT)水平。3.4海马组织HE染色:取大鼠海马组织,固定处理后进行HE染色,显微镜下进行形态学观察。3.5海马细胞凋亡率检测:取大鼠海马组织,采用流式细胞术测定细胞凋亡率。3.6海马Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达:取大鼠海马组织,采用荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达。结果:1丁苯酞对AD大鼠行为学的影响与对照组相比,模型组水迷宫定位航行实验潜伏期、总路程均明显增加(P0.05,P0.01);与对照组相比,模型组空间探索实验站台穿越次数、站台所在象限时间明显减少(P0.05,P0.01)。与模型组比较,丁苯酞中、高剂量组水迷宫定位航行实验潜伏期、总路程均明显减少(P0.05);丁苯酞低、中、高剂量组空间探索实验站台穿越次数、站台所在象限时间均明显增加(P0.05,P0.01)。提示丁苯酞能改善AD大鼠学习、记忆能力。2丁苯酞对AD大鼠氧化应激的影响与对照组比较,模型组大鼠血清MDA含量明显升高,SOD和GSH-Px活性明显降低(P0.01);与模型组相比,丁苯酞低剂量组GSH-Px活性明显升高(P0.01),丁苯酞中、高剂量组大鼠血清MDA含量明显降低,SOD和GSH-Px活性明显升高(P0.05,P0.01)。提示丁苯酞能抑制AD大鼠氧化应激。3丁苯酞对AD大鼠胆碱能神经系统功能的影响与对照组比较,模型组大鼠海马组织ACHE水平明显升高,CHAT水平明显降低(P0.01);与模型组相比,丁苯酞中剂量组海马组织ACHE水平明显降低(P0.01),丁苯酞高剂量组大鼠海马组织ACHE水平明显降低,CHAT水平明显升高(P0.01)。提示丁苯酞能改善AD大鼠胆碱能神经系统功能。4 HE染色组织学观察光学显微镜观察到,对照组大鼠神经元排列紧密,层次清楚,神经元细胞核呈圆形;模型组大鼠神经元排列紊乱,可见疏松区,神经元细胞核核固缩;丁苯酞组与模型组相比,海马组织病理变化有明显改善。5丁苯酞对AD大鼠海马细胞凋亡率的影响与对照组比,模型组大鼠海马细胞凋亡率明显升高(P0.01);与模型组相比,丁苯酞中、高剂量组海马细胞凋亡率显著降低(P0.01)。提示丁苯酞能抑制AD大鼠海马细胞凋亡。6丁苯酞对AD大鼠海马细胞凋亡的影响与对照组比,模型组大鼠海马组织Bcl-2 mRNA表达明显降低,Bax和Caspase-3 mRNA表达明显升高(P0.01);与模型组相比,丁苯酞低剂量组Bax mRNA表达明显降低(P0.01),丁苯酞中、高剂量组海马组织Bcl-2 mRNA表达明显升高,Bax和Caspase-3 mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。提示丁苯酞能下调Bax和Caspase-3 mRNA表达,上调Bcl-2 mRNA表达。结论:丁苯酞有防治阿尔茨海默病大鼠的作用,与下调Bax和Caspase-3表达,上调Bcl-2表达,抑制海马细胞凋亡有关。
【关键词】：丁苯酞 阿尔茨海默病大鼠 氧化应激 胆碱能神经系统 细胞凋亡
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 引言12-14
• 第一部分 丁苯酞对阿尔茨海默病大鼠的作用14-34
• 前言14-15
• 材料与方法15-18
• 结果18-20
• 附图20-26
• 附表26-28
• 讨论28-31
• 小结31-32
• 参考文献32-34
• 第二部分 丁苯酞对阿尔茨海默病大鼠海马细胞凋亡的影响34-50
• 前言34-35
• 材料与方法35-38
• 结果38-39
• 附图39-44
• 附表44-45
• 讨论45-47
• 小结47-48
• 参考文献48-50
• 结论50-51
• 综述 老年痴呆发病机制及药物治疗研究进展51-59
• 参考文献57-59
• 致谢59-60
• 个人简历60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 肖稳;丁萍;杨飞;;阿尔茨海默病早期生物标记物及其检测方法的研究进展[J];中国预防医学杂志;2016年03期

2 朱葛馨;于晓彤;徐立鹏;仝小林;;地黄饮子加减治疗阿尔茨海默病的研究进展[J];山东中医杂志;2016年03期

3 孙元元;李慧;郎文娟;冯加纯;;丁苯酞对急性脑梗死的治疗作用[J];临床荟萃;2016年02期

4 张江霞;张旭;;恩必普联合用药研究进展[J];中国实用神经疾病杂志;2015年14期

5 段磊;司继刚;刘萍;;阿尔茨海默病药物治疗研究进展[J];河北医药;2015年07期

6 张伟;梁智辉;;Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较[J];细胞与分子免疫学杂志;2014年11期

7 谢南昌;陈晨;王翠;张倩;张宏伟;夏建华;连亚军;;线粒体分裂蛋白抑制剂对β淀粉样蛋白诱导小胶质细胞凋亡的作用及机制[J];神经损伤与功能重建;2014年05期

8 Jingli Liu;Jinpin Li;Yi Yang;Xiaoling Wang;Zhaoxia Zhang;Lei Zhang;;Neuronal apoptosis in cerebral ischemia/reperfusion area following electrical stimulation of fastigial nucleus[J];Neural Regeneration Research;2014年07期

9 李令文;陈明苍;季宇彬;;老年痴呆症模型研究进展[J];亚太传统医药;2014年05期

10 方烨;李太勇;李曙平;姜辉;;恩必普治疗超高龄患者老年痴呆症的研究[J];现代中西医结合杂志;2013年06期

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本文编号：1136166