应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白

发布时间：2017-11-06 18:23

  本文关键词：应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白

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【摘要】：作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应。为了能够更好、更安全地采用主动的Aβ免疫疗法达到预防和治疗AD的目的,尝试用家蚕杆状病毒表达系统表达Aβ42蛋白。将Aβ42基因克隆入转移载体质粒pB acP AK8中,并使该重组质粒和家蚕杆状病毒Bm-BacP AK6线性化的DNA共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,经筛选、纯化获得的重组病毒命名为BmN PV-Aβ42。用BmN PV-Aβ42感染BmN细胞和家蚕5龄起蚕后,利用Western blotting在BmN细胞和5龄幼虫血淋巴中均可检测到5 kD左右的特异性条带,证明重组Aβ42蛋白表达成功。ELISA检测显示,重组Aβ42肽在感染后第4天的BmN细胞和感染后第6天的5龄幼虫血淋巴中的表达量分别达到1.1 pg/个、2μg/mL。进一步提高Aβ42在家蚕杆状病毒表达系统中的表达效率,有望为研发预防和治疗阿尔茨海默症的可食性疫苗提供新型原料。
【作者单位】： 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所 浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室;
【基金】：浙江省自然科学基金项目(No.Y3110354) 浙江省教育厅科研项目(No.Y201226220) 国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2012ZX09102301-009,2011AA100603) 浙江省高校生物学重中之重(一级)学科建设项目
【分类号】：R749.16
【正文快照】： 阿尔茨海默症(Alzheimer’disease,AD)是中枢神 经系统的退行性变性疾病,临床表现主要为记忆减退和认知障碍[1]。目前,世界医学界主要针对AD的认知障碍进行治疗,但却缺乏针对AD的主要神经病变特征的药物。β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)的非正常沉积,以及微管相关蛋白

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本文编号：1148856