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对氯苯丙氨酸对果蝇脑内TPH含量变化的影响及行为失调机制初探

发布时间:2017-11-11 03:02

  本文关键词:对氯苯丙氨酸对果蝇脑内TPH含量变化的影响及行为失调机制初探


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【摘要】:阿尔茨海默症(AD),又名痴呆,是一种与年龄相关的影响健康的病症。大量神经病理学研究表明:单胺能系统结构和功能的异常与AD病理学之间有着密切的联系,而与其它单胺相比5-HT对AD的影响更为严格。TPH是5-HT生物合成第一个酶又是限速酶,在前人的研究中已经证实了对TPH进行标记比标记5-HT本身更有意义。本实验以遗传学的经典模式生物—黑腹果蝇为实验材料,选用对氯苯丙氨酸(pCPA)为TPH的有效抑制剂,构建AD果蝇模型,探讨具有老年痴呆症状的果蝇脑内TPH含量的变化和行为失调机制。实验共分为5组,分别是空白对照组和pCPA浓度为3mM、4mM、5mM以及6mM的实验组。首先,观察对比对照组和实验组果蝇生长发育的变化和成蝇的性别比例进行统计分析。结果表明:pCPA能够有效延长幼虫生长时间和延迟幼虫结茧的时间,幼虫第一天结茧的个数和茧的羽化数目都受到不同程度的影响。除此之外,实验组与对照组所得茧的重量和大小都有显著的差异,成蝇的雌雄比例也发生了变化,但这种变化在统计学上并不显著。其次,将不同用药浓度的雌雄分开培养在相应用药浓度的培养基中饲养到21天,进行固定等处理。果蝇头部使用CP包埋切片技术制成连续切片并直接用于免疫组化。免疫组化中使用本实验室自主研制的免疫组化同步调控板,使不同的脑片在相同的条件下进行反应,这样可以有效的排除外界坏境对实验结果的影响。免疫组化结果表明:AMP细胞群随着用药浓度增加,细胞群的大小发生变化,跨越的脑片数目减少,但在6mM实验组中AMP跨越的脑片数目反而增多。位于前脑后侧方且邻近脑壳的IP细胞群在5mM的实验组中不存在,对照组和其它实验组中均正常存在。位于咽下神经节背侧方DLS细胞群周围的纤维投射也发生变化,总体上看实验组纤维数多于对照组,特别是在3mM和4m M的蕈形体周围存在着大量的阳性纤维。终上所述推测:5-HT作为神经激素对果蝇的生命活动进行调节。
【学位授予单位】:东北师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R749.16

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