产前应激对昆明小鼠子代不同时期抑郁相关行为学及中枢神经系统髓鞘发育的影响
本文关键词：产前应激对昆明小鼠子代不同时期抑郁相关行为学及中枢神经系统髓鞘发育的影响
【摘要】：目的建立慢性产前应激(Prenatal Stress,PS)动物模型,观察昆明小鼠(Kung Ming mice)子代不同时期重性抑郁(Major Depression Disorder,MDD)相关行为学特点,并探究产前应激对后代子鼠中枢神经系统髓鞘发育的影响,从而探讨产前应激对后代子鼠的行为学影响是否与髓鞘发育有关。方法以KM小鼠为研究对象,将妊娠KM鼠随机分为2组:空白对照组(No Stress,NS)和产前束缚应激组(Prenatal Restraint Stress,PRS),NS组在妊娠期间不给与任何刺激,PRS组从妊娠第7天开始至生产持续定时定点给与束缚刺激。子鼠长至21天,雌雄小鼠断奶并分笼饲养。应用强迫游泳实验(Forced Swimming Test,FST)和悬尾实验(Suspension Test,TST)两种方法检测子鼠30天、50天和60天行为学情况。为探索孕期应激对子代行为变化的机制我们应用Western Blot及QRT-PCR技术检测子代小鼠不同时期(出生后0、14、21、60天)髓鞘发育相关的生物分子Mag、Mbp、Mobp、Mog、Olig1、Sox10、Plp变化情况。近期研究表明髓鞘变化与精神疾病包括MDD有直接关系,我们应用透射电镜(Transmission Electron Microscope,TEM)技术观察子代小鼠髓鞘形态学变化,了解髓鞘发育情况。结果两种行为学结果分析示PRS组在相同时间内(实验过程的后4min)绝望时间总和(不动时间总和)明显高于NS组(P0.05),且在危急状态下更容易放弃逃生(潜伏不动时间)而进入绝望状态,即潜伏不动时间PRS组明显低于NS组(P0.05);且这种现象在子代小鼠青春期(30天)、青春后期(50天)、成年期(60天)均存在(P0.05)。QRT-PCR检测6种髓鞘发育相关基因Mag、Mbp、Mobp、Mog、Olig1、Sox10在子鼠出生后0、14、60天的表达情况提示,6种基因PRS组明显低于NS组,差异有统计学意义(P㩳0.05);在21天的基因检测中,PRS组两种基因Mbp、Mobp表达明显明显低于NS组,差异有统计学意义(P㩳0.05),其余4种基因PRS组表达高于NS组,但是无统计学意义(P0.05)。髓鞘发育关键蛋白Mag、Mbp及Plp的表达,PRS组明显低于NS组;且Mag、Mbp在小鼠中的表达始于青少年时期(14天),并逐渐升高。透射电镜下,子鼠21天前额叶皮质区域(prefrontal cortex,PFC),PRS组髓鞘壁(g-ratio值0.87±0.074)比NS组髓鞘壁(g-ratio值0.72±0.072)薄,g-ratio值与髓鞘壁厚度成反比,差异有统计学意义(P=0.0256㩳0.05)。结论产前应激能导致后代子鼠MDD相关的行为学改变,并且这种改变在青春期至成年期均存在;产前应激影响后代子鼠髓鞘正常发育、成熟分化相关的生物分子Mag、Mbp、Mobp、Mog、Olig1、SOX10、PLP的表达及髓鞘显微结构的形态学变化;产前应激对后代子鼠产生的MDD相关行为学负面改变可能是通过影响PFC髓鞘发育而起作用。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.4
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