NHE1抑制剂Cariporide及新型FKBPS配体HD5-6对SAMP8快速老化小鼠的作用机制研究

发布时间：2017-12-08 02:13

  本文关键词：NHE1抑制剂Cariporide及新型FKBPS配体HD5-6对SAMP8快速老化小鼠的作用机制研究

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【摘要】：目的 研究钠氢交换蛋白（Na+/H+exchanger1,NHE1）抑制剂cariporide(HOE642)对SAMP8（senescence accelerated-prone mouse8）快速老化小鼠海马神经细胞pH及基因表达谱的影响，探明其对SAMP8快速老化小鼠的作用机制。观察FKBPs(FK506blinding proteins)配体噻嗪酰胺衍生物（HD5-6）对SAMP8快速老化小鼠的学习记忆能力、海马神经元结构以及海马神经元基因表达谱的影响，探讨其对SAMP8小鼠的抗老化作用。为阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发病机制的探索和对其防治药物的研究开发提供进一步的理论及实验依据。 方法 选用10月龄SAMP8雄性小鼠39只，随机分为痴呆组、HD5-6组、HOE642组，每组13只；另选10月龄正常老化的SAMR1(senescenceaccelerated-resistant mouse1)雄性小鼠13只作为正常对照组。各组分别腹腔注射相应药物35d，并于第29d采用Morris水迷宫实验评价正常对照组、痴呆组、HD5-6组三组小鼠学习记忆能力的变化；水迷宫实验结束后，采用HE染色和TUNEL荧光染色观察正常对照组、痴呆组、HD5-6组三组小鼠海马区神经元形态及凋亡情况；采用非损伤微测技术检测正常对照组、痴呆组、HOE642组三组小鼠海马神经细胞H+流速；最后采用Agilent表达谱芯片技术检测各组小鼠海马神经元基因表达谱的变化差异，并用RT-PCR验证芯片结果的可靠性。 结果 在Morris水迷宫实验的定位航行实验中，与正常对照组相比，痴呆组、HD5-6组逃避潜伏期均显著延长（p0.01），表现出明显的学习记忆障碍，但HD5-6组潜伏期较痴呆组明显缩短（p0.01）。HE染色及TUNEL荧光染色结果显示：与正常对照组相比，痴呆组海马区神经元数量明显减少，细胞排列紊乱，大量的神经元细胞核固缩、深染、坏死，其神经元凋亡指数(51.734.48)%明显高于正常对照组(28.0211.25)%（p0.05），而HD5-6干预的SAMP8小鼠海马区神经元病理改变明显改善，海马神经元凋亡指数（20.472.25）%明显降低（p0.01）。非损伤微测实验结果显示：与正常对照组小鼠海马神经细胞H+流速（0.13810.0791pmol.cm-2.s-1）相比，痴呆组小鼠海马神经细胞H+流速（0.38260.0578pmol.cm-2.s-1）明显加快（p0.05）；与痴呆组相比，HOE642干预的SAMP8小鼠H+流速(0.64980.0922pmol·cm-2·s-1）进一步加快（p0.05）。Agilent表达谱芯片结果显示：与痴呆组基因表达谱相比，HOE642干预的SAMP8小鼠海马神经元的表达差异在2倍以上的基因有99条，表达上调的为5条，表达下调的为94条，其中有功能的mRNA中，表达上调的有3条，表达下调的有30条；与痴呆组基因表达谱相比，HD5-6干预的SAMP8小鼠海马神经元的表达差异在2倍以上的基因有118条，表达上调的为9条，表达下调的为109条，其中有功能的mRNA中，，表达上调的有4条，表达下调的有21条。RT-PCR结果显示差异基因表达量与基因表达谱结果具有相同的方向性，芯片结果可靠。 结论 Cariporide能够加重SAMP8快速老化小鼠大脑神经细胞的酸性环境，并且通过对与错误蛋白产生和降解有关的基因表达产生可能的影响，进而影响SAMP8小鼠的老化速度。HD5-6能够改善快速老化小鼠SAMP8的学习记忆能力和海马神经元病理改变，并且通过对基因表达谱产生可能的影响发挥明显的抗衰老作用。
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.1

【参考文献】

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1 Evan Dorey;Nina Chang;Qing Yan Liu;Ze Yang;Wandong Zhang;;Apolipoprotein E, amyloid-beta, and neuroinflammation in Alzheimer's disease[J];Neuroscience Bulletin;2014年02期

本文编号：1264655