HTR3A、HTR3B基因多态性与精神分裂症及其临床表型的关联性研究

发布时间：2018-03-07 12:39

本文选题：5HTR3A　切入点：5HTR3B　出处：《山东大学》2016年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究目的：精神分裂症是一组常见的重性精神病,其全球患病率约为4%o。该病多为慢性迁延性病程,具有高复发率、高致残率的疾病特点,因此其疾病负担相对较高。根据WHO推算,到2020年精神疾病负担将上升至疾病总负担的四分之一,而精神分裂症在全球非致命疾病负担排名中位列第七。精神分裂症多起病于青壮年,广泛损害患者的知觉、思维、情感和行为等方面,其临床症状主要可分为以幻觉妄想为主的阳性症状和以淡漠退缩为主的阴性症状。除此以外,认知症状也是精神分裂症患者的核心症状之一。精神分裂症的病因至今未明,五羟色胺(5一HT)假说是关于该疾病病因学的重要假说之一。HTR3A和HTR3B在均位于染色体11q23上,在位置上非常靠近,从功能上来看,当二者组成复合体时,会具有与内源性HTR3相同的生物学活性。但文献检索目前尚没有发现关于这两个受体的基因多态性与中国汉族人群精神分裂症发病风险以及临床表型的相关研究。本研究将用病例对照研究的方法,探讨HTR3A和HTR3B基因多态性与精神分裂症发病风险以及临床表型的关联性。研究方法：本研究采用病例对照研究的方法,纳入符合入组标准的精神分裂症患者作为病例组,招募符合入组标准的健康人群作为对照组。所有研究对象于入组后次日清晨6：30抽取空腹静脉血5ml,经3000转10分钟离心处理后,用3mlEP管将血清及血细胞分装保存,置于-70℃冰箱保存待提取DNA。选取既往研究有意义,或根据NCBI的基因数据库信息,选择最小等位基因频率(Minor Allele Frequency, MAF)大于10%的位于HTR3A、HTR3B位点共21个,采用飞行-时间质谱分析检测法对所有研究对象的各个位点进行基因检测。同时,采用自制的一般资料调查表收集两组研究对象的一般人口学资料。用PANSS量表(Positive and Negative Syndrome Scale)对病例组的阴性症状、阳性症状和疾病严重程度进行评估,并用该量表的复合量表区分以阳性症状为主的精神分裂症和以阴性症状为主的精神分裂症。分用MATRICS共识认知成套测验(MATRICS consensus cognitive battery, MCCB)对两组研究对象的认知状况进行评估。之后将基因检测结果导入Plinkl.07软件进行数据分析,用卡方检验对各SNP位点的Hardy-Weinberg平衡进行检验。等位基因频率与精神分裂症的关系用卡方分析,对发病风险的预测用逻辑回归分析。采用SPSS20.0软件包对一般资料及基因型与临床资料的关系进行统计分析,对年龄、性别等一般资料用t检验或,检验,PANSS量表及MCCB各项得分在各位点不同基因型间的差异用单因素方差分析,各个位点纯合A2A2基因型与携带有A1等位基因的基因型间的差异用t检验。MCCB各项得分在病例组和正常对照组间的差异用独立样本的t检验。结果：1.一般资料及样本检测：本研究最终纳入精神分裂症患者139例,正常对照组共纳入101例,在年龄、受教育程度、性别方面与病例组相比无显著性差异(p0.05)。对两组研究对象的所有样本的21个多态性位点进行Hardy-Weinberg平衡检验,结果显示,两组研究对象的抽样均符合H-W平衡(p0.05),病例组p值为0.168-1,对照组p值为0.0513-1。所有位点的最小等位基因频率均大于0.05(MAF0.05)。2.HTR3A基因多态性与精神分裂症及其临床亚型发病风险的相关性：位于HTR3A的rs10789980、rs11604247、rs1176719的等位基因频率在病例组和正常对照之间均存在显著性差异(p=0.02,0.009,0.026),OR值分别为1.558、2.124、1.646,置信区间的下限(L95)分别为1.070、1.194、1.059,均大于1。分层比较结果发现,位点rs10789980、rs11604247、rs1176719、rs10160548、rs1176713的等位基因频在以阴性症状为主的精神分裂症与对照组间的差异具有显著性(p=0.001、0.003、0.019、0.014、0.010),危险系数(OR值)分别为2.172、2.594、1.845、1.772、1.876,置信区间的下限(L95)分别为1.381、1.333、1.101、1.118、1.125,均大于1。3.HTR3B基因多态性与精神分裂症及其临床亚型发病风险的相关性：位于HTR3B位点rs1176746、rs3782025、 rs1672717位点在病例组和对照组间的差异具有显著性(p=0.031、0.049、0.046),OR值分别为0.656、0.683、0.682,置信区间的上限(U95)分别为0.963、0.999、0.993,均小于1。分层比较结果发现,位点rs1176744、rs12795805的等位基因频率在以阴性症状为主的精神分裂症和对照组之间的差异具有显著性(p=0.018、0.013),OR值分别为1.963、2.048,置信区间的下限(L95)分别为1.112、1.155,均大于1。4.连锁不平衡和单倍型分析：本研究所选择的HTR3A和HTR3B各SNP位点中多数位点存在一定的连锁不平衡,共形成两个板块,Block 1和Block 2, Block 1包括9各位点,分别是rs3758987、rs3831455、rs4938056、rs12421126、rs1176746、rs1176744、rs2276305、rs3782025和rs1672717。Block 2包括6各位点,分别是rs1176722、rs2276302、rs1176719、rs10160548、rs1176713和rs1182457。其中Block2中GAAGCC单倍体型(χ2=8.600,p=0.003)和GAGGCC单倍体型(χ2=4.390,p=0.036)在病例组和对照组之间存在显著性差异。在以阳性症状为主的精神分裂症患者中,共形成三个板块,Block 1包含11各位点,分别是rs10789970、rs3758987、rs3831455、rs4938056、rs12421126、rs1176746、rs1176744、rs2276305和、rs3782025、rs1672717和rs12765805。B1ock 2包含5各位点,分别是rs1062613、rs11604247、rs1176722、rs2276302和rs11176719。Block3包含3各位点,分别是rs10160548、rs1176713和rs1182457。但所有的单倍体型在以阳性症状为主的精神分裂症组和对照组之间均不存在显著性差异在以阴性症状为主的精神分裂症患者中,共形成三个板块,Block 1、Block 2和Block 3。Block 1包含两个位点,分别是rs10789970和rs3758987。Block 2中包含6个位点,分别是rs12421126、rs1176746、rs176744、rs2276305、rs3782025和rs1672717。Block 3包含6个位点,分别是rs1176722、rs2276302、rs1176719、rs10160548、rs1176713和口rs1182457。其中,Block 2的TCGGTT单倍型在以阴性症状为主的精神分裂症患者和对照组之间存在显著性差异(x2=4.461,p=0.035)。B1ock 3中的GAGTTC单倍型在以阴性症状为主的精神分裂症患者和对照组之间存在显著性差异(x2=6.876,p=0.009),GAAGCC单倍型在以阴性症状为主的精神分裂症患者和对照组间也存在显著性差异(x2=14.456,p=0.0001)。5. HTR3A基因多态性与精神分裂症临床表型的相关性PANSS量表阴性症状得分在rs10789980的各基因型间存在显著性差异(F=5.574,p=0.005),组间比较发现, GG基因型阳性症状得分显著低于AA基因型(p=0.025),而GG基因型的阴性症状得分均显著高于AG基因型(p=0.004)和AA基因型(p=0.004)。AA基因型与携带G等位基因的基因型相比较时,前者的PANSS量表阴性症状得分低于后者,差异具有显著性(t=3.237,p=0.001)。MCCB各项测验的该位点的各基因型间均不存在显著性差异。PANSS量表总分在位点rs1062613、rs1182457、rs1176722、rs2276302的各基因型间存在显著性差异,但是当将所有携带A1等位基因的基因型与纯合的A2A2基因型相比较时,这种差异不再具有显著性(p0.05)。另外,位点rs1176719的AA基因型PANSS量表总分显著高于AG基因型(p=0.05)。位点rs10160548的GG基因型PANSS量表总分显著高于TG基因型(p=0.016),GG基因型阴性症状得分显著高于TT基因型(p=0.033)。在认知功能测验中,位点rs1062613、rs1176722、rs2276302、rs1182457纯合A2A2型MCCB连线测验得分(p=0.009、0.021、0.008、0.032)及数字序列得分(p=0.001、0.004.0.004、0.014)均高于携带A1等位基因的基因型,差异具有显著性。6.HTR3B基因多态性与精神分裂症临床表型的相关性PANSS量表阴性症状得分在位点rs1176744(F=3.950,p=0.022)和rs3758987(F=3.881,p=0.023)各基因型间存在显著性差异。组间比较发现,rs1176744、rs3758987和rs12795805三个位点A,A2基因型的阴性症状得分均显著高于A2A2基因型(p=0.006,0.007,0.018)。位点rs1176744、rs3758987、rs12795805纯合A2A2基因型PANSS量表阴性症状得分低于携带A1等位基因的基因型,差异具有显著性(p=0.007、0.011、0.021)。MCCB各项测验得分在HTR3B各位点的基因型间均不存在显著性差异(p0.05)。结论：1.位于HTR3A的rs10789980、rs11604247、rs1176719的基因多态性可能与精神分裂症的发病有关。Rs10789980、rs11604247、rs1176719、rs10160548、rs1176713的基因多态性可能与以阴性症状为主的精神分裂症的发病有关。2.位于HTR3A的rs10789980的基因多态性可能同时参与了精神分裂症的阳性症状和阴性症状的发生,但影响作用不相同。位点rs10160548、rs2276302、rs1062613、rs1182457、rs1176722的基因多态性可能与精神分裂症疾病的严重程度有关。位点rs10160548的基因多态性可能参与了精神分裂症患者阴性症状的发生。位点rs1062613的基因多态性可能参与了精神分裂症患者阳性症状的发生。3.位于HTR3A的位点rs10160548、rs1062613、rs1176722、rs2276302、rs1182457、rs1176719、rs11604247的基因多态性可能与精神分裂症患者的学习能力、工作记忆、推理和问题解决能力以及社会认知等认知功能的受损有关。4.位于HTR3B位点rs1176746、rs3782025、rsl672717的基因多态性可能与精神分裂症的发病有关。Rs1176744、rs127958056的基因多态性可能与以阴性症状为主的精神分裂症的发病有关。5.位于HTR3B的位点rs3758987、rs1176744、rs12795805的基因多态性可能参与了精神分裂的阴性症状产生。6.HTR3B基因多态性可能与精神分裂症患者认知功能无关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.3

【参考文献】