青春早期应激对孕期感染所致精神分裂症大鼠模型的影响

发布时间：2018-04-30 04:26

本文选题：孕期感染 + 应激　；参考：《新乡医学院》2017年硕士论文

【摘要】：背景精神分裂症“二次打击”假说认为神经发育关键时期的不良应激会引起大脑发育异常,两次不良应激的联合或蓄积作用导致神经环路病理性激活,从而诱发疾病,更符合精神分裂症的发病和发展过程。此外,精神分裂症个体的免疫功能存在紊乱情况。精神分裂症病因的生物学机制可能与小胶质细胞相关的免疫功能紊乱现象相关。目的探究孕中期SD母孕大鼠感染聚肌胞苷酸(polyinsinic acid-polycytidylic acid,Poly(I:C))的子代大鼠,在青春早期接受2周应激对其行为学指标、外周和中枢炎性细胞因子以及脑内炎性细胞的影响,来验证该模型青春晚期精神分裂症的表型特点和免疫紊乱状态,以及该模型是否支持该疾病的“二次打击”假说。方法1.选择15只雄性、5只雌性无特定病原体SD大鼠(11-12周龄)分批育种;2.孕鼠随机均分为孕期感染组和对照组,孕9天尾静脉分别注射10mg/kg Poly(I:C)和等体积0.9%生理盐水。注射3小时后,每组随机选择3只检测血浆中IL-6、IL-1β的蛋白质水平,作为质量控制,以确定注射效果;3.剩余孕鼠自然产子,子鼠于产后21天离乳分笼,每窝子鼠随机均分为2亚组,随机选1亚组于青春早期(产后35天至49天)每天进行冰水游泳(4℃,4分钟)或行为限制(4小时)。此时动物细分为4组,孕期感染联合青春早期应激组(poly(I(25)C)+Stress,PS组)、孕期感染组(poly(I(25)C)+Control,PC组)、青春期早应激组(Control+Stress,CS组)、空白对照组(Control+Control,CC组);4.子鼠在青春晚期(产后56天)分别进行开放旷场、高架十字迷宫、被动规避和PPI,用于检测大鼠的自发活动性、焦虑水平、学习记忆能力和感觉门控水平;5.使用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测青春晚期的子鼠血浆、前额叶皮质和海马脑区脑组织中炎性细胞因子IL-6、IL-1β蛋白质表达水平;6.使用免疫组织化学技术检测青春晚期的子鼠前额叶皮质和海马脑区内钙结合蛋白1(ionized calcium binding adaptor molecule 1,Iba1)的阳性表达情况;7.使用均数±标准差(x±s)表示计量资料。使用两独立样本t检验比较两组孕鼠的数据差异,使用单因素方差分析比较四组子鼠的数据差异。采用双侧检验,检验标准α=0.05。采用SPSS 23.0统计软件对数据进行统计分析。结果1.与对照组相比,孕期感染组孕鼠的血浆中IL-1β、IL-6蛋白质表达水平明显升高,差异有统计学意义(p0.05);2.开放旷场实验中,PS组大鼠总运动距离、中心区域距离远于PC组、CS组、CC组,中心区域运动时间长于CS组、CC组,PS组中心区域运动时间长于CS组、CC组(均p0.05);PC组与PS组、CC组无差异;3.高架十字迷宫实验中,PS组大鼠进入开放臂次数百分比、开放臂时间百分比大于CC组,差异均具有统计学意义(p0.05),PC组与PS组、PC组无差别;4.被动规避实验中,4组子鼠T1值之间无差异(P0.05),PS组T值明显小于CC组,差异有统计学意义(p0.05),PC组与PS、CC组无差别;5.PPI实验中,4组子鼠对惊吓刺激的反应幅度之间差异无统计学意义(P0.05),PS组对惊吓刺激的抑制率(75dB、80dB、85dB%PPI)低于CC组,PC组对惊吓刺激的抑制率仅75dB低于CC组(p0.05),PS组与PC组无差别;6.炎性因子水平中,4组子鼠血浆IL-6蛋白质表达水平没有差异(P0.05),PS组血浆IL-1β蛋白质表达水平高于CC组,PS组前额叶皮质和海马脑区脑组织中IL-6、IL-1β蛋白质表达水平高于CC组,差异均具有统计学意义(P0.05);7.炎性细胞中,PS组大脑前额叶和海马区域Iba1阳性细胞OD值高于CC组(P0.05),且小胶质细胞的胞体变大,突触粗短等呈现为活化状态。结论1.青春早期应激使孕期感染子代大鼠提前至青春晚期表现出更稳定、严重的行为学、免疫功能变化。2.孕期感染联合青春期早期应激的子代大鼠在青春晚期稳定表现出精神分裂症样行为:自发活动增加,焦虑情绪减轻,认知功能障碍。3.孕期感染联合青春期早期应激的子代大鼠在青春晚期表现出外周和中枢存在炎性状态,大脑海马区和前额叶皮质区小胶质细胞异常活化。4.外周和中枢的炎性状态可能使小胶质细胞异常活化,这可能是大鼠出现行为学异常的重要因素,提供了疾病治疗相关方向。
[Abstract]:Objective To investigate the effects of two weeks of stress on the behavior , peripheral and central inflammatory cytokines and inflammatory cells of the brain . Methods 1 . Fifteen male and five female rats were randomly divided into two groups : poly ( I ( 25 ) C ) + Stress , PS group ) , early puberty stress group ( control + stress , CS group ) , control + control group ( CC group ) , and 4 . The rats were randomly divided into 4 groups , the high frame cross maze , passive avoidance and PPI were used to detect the spontaneous activity and anxiety level of rats . The levels of IL - 1尾 , IL - 1尾protein in the brain tissues of young rats with late adolescence were detected by enzyme linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The difference of IL - 1尾 , IL - 6 protein expression was statistically significant ( P < 0.05 ) . There was no difference in the level of IL - 6 and IL - 1尾 in the cerebral cortex and hippocampus of PS group than in CC group ( P0.05 ) .

【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R749.3;R-332

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