氧化应激在阿尔茨海默病发病机制中的作用及其靶点药物的开发

发布时间：2019-11-25 10:05

【摘要】：阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种最常见的神经退行性疾病,约占痴呆原因的60%,典型病理特征包括老年斑的形成,神经纤维缠结以及神经元死亡。目前研究认为β淀粉样蛋白(beta amyloid, Aβ)诱导的氧化应激和线粒体功能障碍在AD发病中发挥关键作用。 目的：探讨坡垒酚甲(Hopeahainol A, Hop A)和甘草酸二铵(Diammonium glycyrrhizinate,DG)对Ap1-42诱导神经毒性的保护作用。 方法：(1)第一部分研究利用高效液相色谱法,电镜以及染色法评价HopA对于Aβ1-42体内外聚集能力的影响。ELISA法检测HopA处理APP/PS1转基因小鼠脑组织氧化应激水平的变化,电生理学检测HopA对于APP/PS1转基因小鼠海马长时程电位(long term potential, LTP)的影响,行为学检测HopA对于APP/PS1转基因小鼠的认知以及记忆功能的影响。(2)第二部分研究利用MTT, LDH以及AnnexinV/PI染色判断DG对Aβ1-42处理神经元细胞活性的影响,Real-time PCR和Western blot检测DG对于过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator la, PGC-la)水平的表达,并通过报告基因技术探讨DG的可能作用位点。同时行为学检测DG对于Aβ1-42诱导AD小鼠的认知以及记忆功能的影响。 结果：(1)野生型B6小鼠经尾静脉注射HopA,可以在血清,脑组织以及脑脊液检测到HopA的存在。HopA能够显著降低APP/PS1小鼠脑皮质和海马区蛋白,脂质以及核酸过氧化产物3-NT,4-HNE以及8-OHGD的水平,电镜以及刚果红染色结果证实HopA可以抑制Aβ1-42的纤维化和沉积；电生理结果显示HopA明显改善APP/PS1小鼠突触功能以及海马CA1区的LTP诱导功能；行为学结果显示HopA明显减少APP/PS1小鼠找到平台的潜伏期以及上台前路程,同时增加其穿过平台的次数。(2)MTT, LDH以及AnnexinV/PI染色证实DG能够显著提高神经元细胞活力并减少其凋亡水平,DG能够部分代偿Aβ1-42所致的神经元线粒体膜电位降低,同时明显降低细胞色素c的释放以及下游caspase-9和caspase-3的活性。DG能够显著上调PGC-1α的mRNA和蛋白水平,而特异性抑制PGC-1α则部分抑制了其保护作用。对PGC-1α的启动子分析显示,DG可能通过上调CREB从而诱导PGC-1α的转录。行为学结果显示DG明显减少AD小鼠找到平台的潜伏期以及上台前路程,同时增加其穿过平台的次数。 结论：氧化应激在AD的发病机制中发挥重要作用,而针对氧化应激过程中两种靶分子ABAD和PGC-1α的药物HopA与DG通过抑制氧化应激抑制Aβ-42诱导的神经毒性,提示HopA与DG是两种潜在治疗AD的新型药物。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R749.16

【参考文献】

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本文编号：2565667