雷帕霉素通过调节自噬-溶酶体系统功能改善apoE-5XFAD转基因小鼠学习记忆障碍

发布时间：2017-03-20 00:06

  本文关键词：雷帕霉素通过调节自噬-溶酶体系统功能改善apoE-5XFAD转基因小鼠学习记忆障碍，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【目的】β淀粉样蛋白（β amyloid，Aβ）代谢异常是阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）发病机制的重要环节。自噬在AD发病机制中可能起双重作用,既可加速疾病的进展，但在某些条件下又起保护作用,可能通过调节Aβ产生和降解的动态平衡而影响疾病的进展。ApoE4是AD重要的危险因素，ApoE可能通过其特定的亚型调节Aβ诱导的神经毒性作用，，但是关于自噬和ApoE4参与AD发病的具体机制仍不明确。本研究以表达人ApoE4、ApoE3、ApoE2和ApoE基因敲除的APP/PS1AD转基因动物为模型（apoE-5XFAD转基因小鼠），应用Rapamycin诱导激活自噬-溶酶体系统，观察ApoE不同遗传背景和年龄下脑内自噬-溶酶体系统功能、神经病理学和行为学差异。 【方法】 SPF级1.5月龄、3月龄、6月龄雄性apoE-5XFAD转基因小鼠随机分为溶媒对照组、雷帕霉素处理组（1mg/Kg），每组8～11只，灌胃给药，每日1次，共30天。采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力。电镜观察海马CA1区自噬-溶酶体的超微结构及数量。免疫组化和ELISA检测脑内Aβ水平。免疫荧光观察脑内自噬体、溶酶体以及溶酶体酶的数量。Western blotting检测海马自噬体标记物LC-3、溶酶体酶Cathepsin D、自噬信号通路中pmTOR/mTOR和beclin-1的表达。 【结果】雷帕霉素可不同程度改善apoE/5XFAD转基因小鼠视空间学习记忆能力，以6月龄apoE3/5XFAD、apoE4/5XFAD组改善最为明显。雷帕霉素可减少不同月龄、不同亚型apoE/5XFAD转基因小鼠海马自噬小体内电子致密物的沉积。雷帕霉素可抑制pmTOR的表达，增加自噬体标记物LC-3和组织蛋白酶D（CathepsinD）的表达，调节自噬溶酶体系统的功能。雷帕霉素可减少apoE/5XFAD转基因小鼠海马内不溶性Aβ的数量，尤以6月龄apoE4/5XFAD组减少最为明显。 【结论】随着年龄的增加不同亚型的apoE/5XFAD转基因小鼠的视空间学习记忆能力逐渐下降，以apoE4/5XFAD和apoE-KO/5XFAD转基因鼠下降最为明显。雷帕霉素通过抑制mTOR激活自噬，调节自噬溶酶体系统的功能，减少不溶性Aβ的产生，促进Aβ的降解，从而改善apoE/5XFAD转基因小鼠的视空间学习记忆能力。因此雷帕霉素有望成为AD治疗的候选药物。
【关键词】：阿尔茨海默病 自噬-溶酶体 雷帕霉素 apoE-5XFAD转基因小鼠 β 淀粉样蛋白
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 引言9-12
• 材料和方法12-20
• 结果20-31
• 讨论31-36
• 结论36-37
• References37-41
• 综述41-47
• References45-47
• 致谢47-48
• 个人简历48

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本文编号：256806