大豆甙元对慢性应激大鼠海马BDNF和NPY表达及非特异免疫调节的作用

发布时间：2019-12-05 13:07

【摘要】：目的:探讨大豆甙元(Daidzein)对慢性应激抑郁模型大鼠海马脑源性神经生长因子(BDNF)、神经肽Y(NPY)蛋白表达和非特异免疫调节作用的影响。方法:取健康成年SD大鼠40只,雄性,体质量(210±19)g,清洁级,用1%蔗糖水喂养4 d,使动物原来的饮水习惯发生改变。第5天开始24 h禁水,但不禁食,第6天给予1%蔗糖水4 h,测1%蔗糖水的偏嗜度。根据1%蔗糖水偏嗜度和体重随机分成4组,每组10只,糖水偏嗜度和体重各组间没有显著差异(P0.05)。正常对照组(CG)、模型对照组(MG)、氟西汀对照组(FG,10.0 mg/kg)、大豆甙元组(DG,80.0 mg/kg)。造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药32 d。造模方法为慢性轻度不可预见性的应激模型加孤养。观察大鼠的行为改变,免疫蛋白印记(Western blot)技术和免疫组织化学法检测海马BNDF和NPY表达,观察淋巴细胞增值功能,脾脏指数,外周血白细胞数目及抗体分泌细胞功能。结果:与正常对照组相比慢性应急刺激大鼠体重、蔗糖消耗量及大鼠旷场试验得分显著降低,游泳不动时间延长,海马BNDF和NPY表达水平低下,差异有统计学意义(P0.01)。氟西汀治疗组和大豆甙元治疗组与模型对照组相比大鼠体重、蔗糖消耗量、大鼠旷场试验得分以及海马BNDF和NPY表达水平显著增加,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。大豆甙元组大鼠外周血白细胞数目、抗体分泌细胞功能及淋巴细胞增殖力显著高于模型组。大豆甙元剂量脾脏指数显著高于模型组(P0.01)。结论:大豆甙元能显著拮抗慢性应激模型大鼠抑郁症状,大豆甙元可增加海马内BDNF和NPY蛋白的含量,并且有增强慢性应激模型大鼠体液免疫应答和淋巴细胞增殖能力的作用,大豆甙元拮抗慢性应激模型大鼠抑郁作用的机制可能与大豆甙元治疗后海马中BDNF和NPY蛋白含量增加及免疫调节作用有关。
【图文】：

4DG对大鼠强迫游泳的不动时间影响大鼠在不可预知的应激刺激后，不同程度地产生了抑郁症状，自主活动减少，造模后进行强迫游泳实验中，与CG相比MG在慢性应激作用下大鼠强迫游泳不动时间显著延长(P＜0.01);FG和DG大鼠强迫游泳不动时间显著增加随时间呈升高趋势，与MG相比差异有统计学显著意义(P＜0.05或P＜0.01)，见表4。2.5大鼠海马区BDNF和NPY蛋白Westernblot检测MG与CG相比，大鼠海马BDNF和NPY的表达下降，差异有统计学意义(P＜0.01);FG和DG与MG相比，BDNF和NPY蛋白表达明显的增加，差异有统计学意义(P＜0.01)，见图1。表3大鼠旷场试验得分(x±s，n=10)Tab．3Scoresofopenfieldtestinrat(x±s，n=10)GroupsLevelscoreVerticalscoreCG81.58±9.3520.62±6.53MG55.49±6.502)8.81±2.012)FG66.58±8.812)4)14.16±4.252)4)DG74.22±11.141)4)16.23±5.291)4)Note:ComparedwithCG，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.表4大鼠强迫游泳不动时间(x±s，n=10)Tab．4Immobilitytimeofforcedswimminginrat(x±s，n=10)GroupsSwimmingimmobilitytime(s)Swimmingfixedratio(%)CG65.59±8.8121.86±2.94MG120.64±19.452)40.21±6.482)FG95.16±9.432)4)31.72±3.142)4)DG83.81±9.362)4)27.94±3.122)4)Note:ComparedwithCG，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.2.6免疫组织化学检测免疫组化阳性的判定标准为胞膜和胞质呈棕黄色染色，与CG海马BDNF和NPY免疫组化单位面积阳性细胞数目和积分光密度的表达相比较，MG大鼠海马BDNF和NPY免疫组化阳性细胞数目和积分光密度水平显著降低，其差异有统计学意义(P＜0.01);FG和DG胞膜和

2)FG95.16±9.432)4)31.72±3.142)4)DG83.81±9.362)4)27.94±3.122)4)Note:ComparedwithCG，，1)P＜0.05，2)P＜0.01;comparedwithMG，3)P＜0.05，4)P＜0.01.2.6免疫组织化学检测免疫组化阳性的判定标准为胞膜和胞质呈棕黄色染色，与CG海马BDNF和NPY免疫组化单位面积阳性细胞数目和积分光密度的表达相比较，MG大鼠海马BDNF和NPY免疫组化阳性细胞数目和积分光密度水平显著降低，其差异有统计学意义(P＜0.01);FG和DG胞膜和胞质呈明显的免疫组化阳性反应，与MG相比差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)，见图2，表5。2.7免疫器官重量及淋巴细胞转化的测定大鼠慢性应激刺激后，与CG相比MG大鼠脾脏指数下降有统计学意义(P＜0.05)，DG与MG相比对脾脏指数增强作用显著(P＜0.01);与CG相比MG大鼠白细胞数及淋巴细胞增殖能力显著下降(P＜0.01)，FG和DG与MG相比白细胞数、抗体分泌细胞功能及淋巴细胞增殖能力显著提高(P＜0.01)，见表6。图1大鼠海马区BDNF和NPY蛋白表达Fig．1ExpressionofBDNFandNPYinhippocampusofratsNote:ComparedwithCG，*.P＜0.05，＊＊.P＜0.01;comparedwithMG，#.P＜0.05，##.P＜0.01.图2大鼠海马BDNF和NPY免疫组织化学染色(×200)Fig．2ImmunohistochemistryofBDNFandNPYinhippo-campusofrats(×200)Note:A.CG;B.MG;C.GF;D.DG.表5大鼠海马BDNF和NPY表达阳性细胞数目和阳性细胞积分光密度(x±s，n=10)Tab．5NumberofBDNFandNPYpositiveexpressioncellsandintegratedopticaldensityofpositivecells(x±s，n=10)GroupsBDNF(n)NPY(n)BDNF(od)NPY(od)CG11.52±2.45836.59±64.0411.84±2.91793.83±73.08MG5.66±2.112)332.14±44.192)6.00±1.422)339.51±42.042)FG9.25±1.641)4)3

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本文编号：2570019