FGF22调控IL-1β抑制抑郁症海马细胞凋亡的机制研究

发布时间：2020-04-08 11:42

【摘要】：目的1.研究首发抑郁症患者在抗抑郁治疗前后血清成纤维细胞生长因子22(FGF22)的变化,及血清FGF22与白介素1β(IL-1β)水平、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)之间的关系,为探讨FGF22在抑郁症发病中的作用机制提供帮助。2.建立大鼠慢性不可预见性应激(CUMS)抑郁模型并培养海马原代细胞,对海马细胞内FGF22和IL-1β表达变化、大鼠抑郁行为学改变及海马神经元细胞凋亡进行研究,以期明确抑郁症海马中FGF22与IL-1β间的作用关系及抑郁症海马中FGF22/IL-1β通路对海马神经元细胞凋亡的调节作用,为抑郁症疾病的发病机制提供更多理论依据。方法1.共收集90例首发抑郁症患者,均予帕罗西汀进行抗抑郁治疗8周,分别在其治疗前后采用ELISA法检测血清FGF22和IL-1β水平,并评定HAMD量表,行相关性分析,同期收集90例健康志愿者作为对照组,并对上述采集数据进行统计分析。2.60只雄性SD大鼠随机抽取36只,分为6组[正常对照组(NC组)、慢性不可预知性应激模型组(CUMS组)、CUMS模型+慢病毒阴性对照组(CUMS+Mock~1组)、CUMS模型+慢病毒介导的FGF22过表达组(CUMS+FGF22)、CUMS模型+生理盐水组(CUMS+Mock~2组)、CUMS模型+IL-1ra组(CUMS+IL-1ra组)](每组6只)。观察内容如下:⑴采用体质量、旷场实验和强迫游泳实验对NC组和CUMS组大鼠行为学变化进行观察,以评估抑郁模型建立成功与否;⑵采用上述行为学检测方法对CUMS、CUMS+Mock~1和CUMS+FGF22三组大鼠的抑郁样行为进行观察,采用Western blot法和免疫组织化学染色法检测该三组大鼠海马内IL-1β水平和海马神经元细胞凋亡的变化;⑶采用行为学检测方法对CUMS、CUMS+Mock~2和CUMS+IL-1ra三组大鼠抑郁样行为进行观察,采用Western blot法观察该三组大鼠海马神经元细胞凋亡的变化。另24只大鼠在建模4周过程中,每周处死6只,采用Western blot法检测大鼠海马内FGF22和IL-1β表达随时间梯度变化的情况。3.原代培养大鼠海马神经元细胞,将细胞随机分为对照组、100μg/l FGF22处理组、200μg/l FGF22处理组;在培养24h后采用Western blot法对细胞内IL-1β、Bcl-2、Bad蛋白水平进行检测,并采用AnnexinV/PI流式细胞仪检测细胞凋亡。结果1.首发抑郁症组治疗前血清FGF22水平明显低于健康对照组(180.44±17.02 vs 200.74±16.63,t_((179))=8.090,P0.01)、血清IL-1β水平显著高于健康对照组(11.23±1.89 vs 5.22±1.60,t_((179))=23.02,P0.01),差异均具有统计学意义。2.抗抑郁治疗后抑郁症组患者血清FGF22水平较治疗前显著增高(180.44±17.02 vs 195.74±19.57,t_((179))=13.18,P0.01)、血清IL-1β水平则较治疗前明显下降(11.23±1.89 vs 8.16±1.50,t_((179))=15.82,P0.01),差异均具有统计学意义。3.相关性分析结果显示:血清FGF22与HAMD评分呈负相关(r=-0.691,P0.01),与血清IL-1β亦呈负相关(r=-0.685,P0.01);IL-1β与HAMD评分呈正相关(r=0.749,P0.01)。4.通过CUMS法建模4周后,对SD大鼠进行体质量、旷场实验及强迫游泳实验检测等,证实CUMS是一种良好的抑郁建模方法。5.在4周CUMS建模过程中,随着建模时间的延长,大鼠海马内FGF22表达量逐步减少、IL-1β表达则逐渐增加(P0.05或P0.01)。6.海马内FGF22的过表达减轻了CUMS诱导的抑郁样行为及海马细胞凋亡;且过表达FGF22下调了海马内IL-1β的表达;海马内注射IL-1ra同样缓解了CUMS诱导的抑郁样行为及海马细胞凋亡的作用(P0.05或P0.01)。7.接受FGF22处理的原代海马细胞表现出IL-1β蛋白水平下降和海马神经元细胞凋亡的减少,且呈现出对FGF22反应的剂量依赖性,200μg/l FGF22组较100μg/l FGF22组变化更加明显(P0.05或P0.01)。结论1.首发抑郁症患者血清中FGF22水平降低,可作为反映抑郁症患者病情程度的良好指标,在抑郁症发病机制中发挥着重要作用。2.FGF22可以通过降低IL-1β的表达从而发挥着抗海马细胞凋亡、抗抑郁的作用,进一步揭示了抑郁症疾病的发病机制,为神经营养学说和炎性学说的交叉融合提供了更多的实验证据。
【图文】：

统计学意义,抑郁症,基线,血清

抑郁症组与对照组基线血清FGF22及IL-1β检测结果

血清,抑郁症

(179)= 15.82, P＜0.01)，，见图2-2。图2-2 抑郁症组抗抑郁治疗后血清FGF22及IL-1β水平改变A：治疗后血清FGF22水平改变 B：治疗后血清FGF22水平改变Figure 2-2 Changes in serum FGF22 levels and IL-1β levels in depressive patients after treatment.A：Changes in serum FGF22 levels after treatment.
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R749.4

【参考文献】