蝎毒耐热蛋白对海马注射淀粉样β蛋白致阿尔茨海默病大鼠模型作用的研究
发布时间：2020-04-10 19:07
【摘要】： 背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)是引起痴呆的最常见疾病。随着人口老龄化的发展,AD已成为影响老年人健康的一个突出问题,严重威胁着老年人的身体健康和生活质量。AD的病因和发病机制目前还不清楚,对于AD至今尚无有效的治疗方法,目前仍以对症治疗为主。由于缺乏一种与AD病理和行为等改变相似的理想动物模型,使AD基础研究和药物开发受到限制。近年来经过研究,大多数学者支持淀粉样β蛋白(amyloid beta protein, Aβ)学说,认为Aβ的产生及其沉积可能是AD致病的核心诱导因素。 目的:本实验应用Aβ1-40进行海马注射复制AD大鼠模型,进而给予蝎毒耐热蛋白(Scorpion Venom heat-resistant protein, SVHRP)进行干预,通过观察行为学、星形胶质细胞及神经细胞突触的变化,检测Aβ1-40海马注射是否可建立一种可靠的动物模型,并研究SVHRP对AD模型大鼠的治疗效果,探讨AD的发病机制和治疗机理。 方法:实验动物Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,雄性,体重300g±50g。行水迷宫实验进行初步筛选,然后随机分为3组,即正常对照组9只,AD模型组8只,SVHRP干预组7只。参照文献利用脑立体定位仪进行双侧海马定位注射,正常对照组注射溶媒液,AD模型组和SVHRP干预组注射聚集状态的Aβ1-40。术后SVHRP干预组大鼠腹腔注射SVHRP,正常对照组和AD模型组腹腔注射三蒸水连续干预10天。然后开始为期5天的水迷宫测试,记录大鼠寻找平台的逃避潜伏期以及大鼠在目标象限游泳距离百分比和游泳时间百分比。测试后4%多聚甲醛(paraformaldehyde, PFA)心脏灌注固定,取脑,放入4% PFA中后固定24小时,梯度蔗糖脱水,OCT包埋剂包埋后行冰冻切片。以注射点为中心连续冠状切片,厚10μm。进行GFAP、p38免疫组织化学染色。应用图像分析系统进行GFAP阳性表达细胞计数、p38免疫阳性产物累积光密度(integrated optical density, IOD)及面积测量。所有数据用SPSS11. 5软件包处理分析。 结果: 1. Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)行为学测试实验结果: ⑴定位航行实验:5天逃避潜伏期比较,模型组大鼠长于对照组、干预组大鼠,5天逃避潜伏期变化趋势看,对照组逃避潜伏期越来越短,而模型组和干预组逃避潜伏期上下波动,其中干预组相对于模型组波动较小。 ⑵空间搜索实验:模型组大鼠与对照组、干预组比较,在目标象限(平台象限)内游泳搜索的距离、时间都明显减少。 2. GFAP免疫组织化学染色结果: 模型组针道周围GFAP阳性表达与对照组、干预组比较可见,细胞数量明显增多(p0.05或p0.01),胞体肥大、形态各异,突起增长、增粗、不规则、染色加深;而对照组与干预组无显著差异。 3. p38免疫组织化学染色结果: 模型组免疫产物与对照组、干预组比较,阳性产物稀疏而染色较浅;阳性产物IOD和面积测量显示:模型组p38阳性反应产物与对照组、干预组比较,明显降低(P0.05或P0.01);对照组与干预组之间无差异。 结论: 1.进行Aβ1-40大鼠海马注射可引起大鼠学习记忆障碍及星形胶质细胞活化、p38表达下降。 2.SVHRP可明显改善AD模型大鼠学习记忆障碍,并抑制星形胶质细胞活化,促进p38表达。
【图文】：
透射电镜观察Aβ1 - 40聚集状态发现，孵育前Aβ1 - 40分散、均匀分布育后聚集明显，可见呈条索状（图1）。二．水迷宫实验结果：(1)定位航行实验结果（表 1、图 2）： 5 天逃避潜伏期比较，模鼠长于对照组、干预组大鼠，其中模型组与干预组比较有显著变化0.05）；每天逃避潜伏期两两比较，模型组基本上长于对照组、干预中第 2 天比较，模型组明显长于对照组、干预组（P＜0.05），第 较，模型组明显长于干预组（P＜0.05）。5 天逃避潜伏期变化趋势照组逃避潜伏期越来越短，而模型组和干预组逃避潜伏期上下波动中干预组波动较小。(2) 空间搜索实验结果（表 2、图 3）：模型组大鼠与对照组、相比，在目标象限内游泳搜索的距离百分比、时间百分比都减少，显著差异；对照组大鼠与干预组大鼠相比，变化不明显。
4.43±2.061 0 .8 6 ± 2 .4 4 10.36±1.93 9.04±1.76 6.94±1.72 4.24±2.18 20.56±3.23 14.54±2.05 11.03±1.87 9.96±1.82 .89±2.339 .9 7 ± 3 .4 5＃ 7.48±2.19△ 8.09±2.00 4.89±1.95 间点组间比较：对照组与模型组比较 p<0.05；＃干预组与；△干预组与模型组比较 p<0.05组与模型组 5 天逃避潜伏期比较 P<0.05别 目标象限游泳距离（％） 目标象限游泳时间（组 42.93±7.20 46.36±8.46组 38.50±8.11 40.94±7.03组 44.00±6.27 46.70±6.05 三组大鼠在目标象限内游泳距离和游泳时间百分比（ x±s，n＝
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R749.16
本文编号：2622606
【图文】：
透射电镜观察Aβ1 - 40聚集状态发现，孵育前Aβ1 - 40分散、均匀分布育后聚集明显，可见呈条索状（图1）。二．水迷宫实验结果：(1)定位航行实验结果（表 1、图 2）： 5 天逃避潜伏期比较，模鼠长于对照组、干预组大鼠，其中模型组与干预组比较有显著变化0.05）；每天逃避潜伏期两两比较，模型组基本上长于对照组、干预中第 2 天比较，模型组明显长于对照组、干预组（P＜0.05），第 较，模型组明显长于干预组（P＜0.05）。5 天逃避潜伏期变化趋势照组逃避潜伏期越来越短，而模型组和干预组逃避潜伏期上下波动中干预组波动较小。(2) 空间搜索实验结果（表 2、图 3）：模型组大鼠与对照组、相比，在目标象限内游泳搜索的距离百分比、时间百分比都减少，显著差异；对照组大鼠与干预组大鼠相比，变化不明显。
4.43±2.061 0 .8 6 ± 2 .4 4 10.36±1.93 9.04±1.76 6.94±1.72 4.24±2.18 20.56±3.23 14.54±2.05 11.03±1.87 9.96±1.82 .89±2.339 .9 7 ± 3 .4 5＃ 7.48±2.19△ 8.09±2.00 4.89±1.95 间点组间比较：对照组与模型组比较 p<0.05；＃干预组与；△干预组与模型组比较 p<0.05组与模型组 5 天逃避潜伏期比较 P<0.05别 目标象限游泳距离（％） 目标象限游泳时间（组 42.93±7.20 46.36±8.46组 38.50±8.11 40.94±7.03组 44.00±6.27 46.70±6.05 三组大鼠在目标象限内游泳距离和游泳时间百分比（ x±s，n＝
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R749.16
【参考文献】
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本文编号：2622606
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