蛋白质组学技术分离及鉴定人脑氧化蛋白质

发布时间：2020-06-12 17:21

【摘要】：背景:氧化修饰蛋白质在脑老化及阿尔茨海默病等老年变性神经病的发病机制中扮演着重要角色。蛋白质组学技术可以发现氧化修饰蛋白质,为相关疾病的药物治疗选择新的靶标。目的:建立以双向电泳结合Western blot及生物质谱技术分离、鉴定人脑氧化修饰蛋白质的方法。方法:取3个无神经系统疾患的男性脑组织蛋白,第一向等电聚焦电泳后,固相pH梯度胶条同二硝基苯肼反应,然后行第二向SDS-PAGE电泳。2张相同凝胶中的1张行考马斯亮蓝染色,另1张凝胶上免疫荧光显色。同PVDF膜上显色点相对应的考染凝胶上的蛋白质点即为氧化修饰蛋白质。凝胶蛋白胶内酶解,基质辅助激光解析飞行时间串联质谱鉴定氧化修饰蛋白质。结果与结论:从提取的脑组织中鉴定出β-肌动蛋白、天冬氨酸氨基转移酶、果糖二磷酸醛缩酶、磷酸甘油酸激酶、1,3-磷酸甘油醛脱氢酶、碳酰还原酶1、磷酸丙糖异构酶、转酮醇酶、丙酮酸激酶、血清白蛋白前体、二氢嘧啶酶相关蛋白质2、热休克蛋白60为氧化修饰蛋白质。说明实验成功建立了用蛋白质组学技术分离及鉴定人脑氧化蛋白质的方法。

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈守义;张欣强;刘俊华;胡玉山;龚玉娇;李钏华;王鸣;;霍乱弧菌菌体蛋白双向电泳技术的建立[J];热带医学杂志;2008年04期

2 李丽梅;王秀梅;;HepG2细胞蛋白质组双向电泳条件的优化与图谱的建立[J];内蒙古医学杂志;2011年05期

3 邱芳华;饶卫农;周强;陈求刚;肖洪广;;双向凝胶电泳分析脾脏蛋白组学的方法研究[J];中国热带医学;2011年01期

4 何东苟;蛋白质组学研究及其在寄生虫学上的应用[J];中国热带医学;2003年04期

5 刘国红;孙芸;呼林;张钦宪;;人胃黏膜蛋白质组双向电泳图谱的获得和分析[J];郑州大学学报(医学版);2008年06期

6 罗元明,刘彦信,郑德先;蛋白质组学研究方法及其在生物医学中的应用[J];基础医学与临床;2003年02期

7 王明华;蒋东;吴士良;王久存;;GSFs细胞蛋白质组双向电泳图谱的建立[J];江苏大学学报(医学版);2006年06期

8 徐菲菲;孙胜;刘秀华;;缺氧预处理诱导心肌细胞蛋白质组变化的初步研究[J];化学学报;2006年06期

9 陈剑波;蔡建春;;质膜蛋白质组学技术的研究进展[J];中外医学研究;2011年13期

10 郑辉;吴峗;余轶婧;钟政荣;罗庆礼;沈继龙;;双向电泳联合免疫印迹技术分析日本血吸虫成虫可溶性抗原[J];临床输血与检验;2009年02期

相关会议论文 前10条

1 黄海燕;刘建军;庄志雄;李习艺;卫秦芝;杨晓华;杨建平;;L-02肝细胞蛋白质双向电泳条件的建立[A];第五届广东省环境诱变剂学会暨第三届广东省预防医学会卫生毒理专业委员会学术交流会论文集[C];2006年

2 徐良;张奉春;;60kd SSA/Ro抗原的提出、纯化及蛋白质组学鉴定[A];首届全国中青年风湿病学学术大会论文汇编[C];2004年

3 李明;肖志强;陈主初;李建玲;冯雪萍;张鹏飞;;人类结肠上皮衰老相关的蛋白质组学分析[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年

4 耿建林;魏海明;孙lm;田志刚;;MyD88相互作用蛋白的免疫蛋白质组学研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

5 李庆云;李敏;冯耘;郭倩;顾淑一;万欢英;;慢性间歇缺氧致雄性小鼠血管损伤的蛋白质组学研究[A];2008年中国睡眠研究会第五届学术年会论文摘要汇编[C];2008年

6 徐晨;石建莉;杨征敏;王;程国艳;李定;王一飞;周元聪;刘小龙;;从微生物寻找免疫节育抗原的研究[A];第十届全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2005年

7 张世联;;生命科学新的研究领域-蛋白质组学应用简介[A];2006年全国微循环与血液流变学暨分子生物学新进展学术研讨会专题学术报告论文集[C];2006年

8 苗兰;李欣志;刘建勋;;中国小型猪冠心病模型的蛋白质组学研究[A];2008心血管药理学术研讨会论文汇编[C];2008年

9 胡水旺;姜勇;;荧光差异双向电泳技术平台在疾病蛋白质组学中的应用[A];中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议论文汇编[C];2008年

10 方敏;茹强;王洪云;茹炳根;;人三叶因子3体外拮抗顺铂诱导HCT116细胞凋亡的蛋白质组学研究[A];中国蛋白质组学第三届学术大会论文摘要[C];2005年

相关重要报纸文章 前10条

1 黎明;科学新宠——蛋白质组学[N];医药经济报;2001年

2 本报特约记者 洛频;利用蛋白质组学加速癌症研究[N];中国高新技术产业导报;2002年

3 丁丁;科学家将发起人类蛋白质组计划[N];中国医药报;2008年

4 本报记者 张荔子;蛋白质组学：人类下一个目标[N];健康报;2001年

5 ;打开生命的“万花筒”[N];科技日报;2007年

6 胡德荣;中德科学家联手分析蛋白质拓扑结构和功能[N];健康报;2006年

7 金光亮;证候基因组学和证候蛋白质组学[N];中国医药报;2003年

8 记者 王庭君;600多名蛋白质组学专家来泰研讨[N];泰州日报;2009年

9 张中桥;生理盐水灌注法展示肺组织蛋白可获更多生物学信息[N];中国医药报;2006年

10 吴一福;军事医学科学院从MSCs中筛选出重要差异蛋白[N];中国医药报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 赵忠鹏;布鲁氏菌毒力、免疫相关分子的筛选研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

2 何昆;H-Ras介导细胞转化的蛋白质组学分析[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

3 霍然;人睾丸蛋白质表达谱的构建及精子发生相关蛋白质组学研究[D];南京医科大学;2006年

4 李明;人结肠上皮衰老机制的蛋白质组学研究[D];中南大学;2007年

5 王从斌;人类十二指肠液蛋白质组学研究[D];中国协和医科大学;2008年

6 袁泉;双向凝胶电泳技术研究及其在蛋白质组学中的应用[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2004年

7 刘锋;人CD34+造血干/祖细胞和日本血吸虫的转录组学和蛋白质组学研究[D];复旦大学;2006年

8 曾群力;电磁场对细胞蛋白质表达的影响[D];浙江大学;2007年

9 李丽莉;贝氏柯克斯体与单核细胞相互作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

10 张国安;生物质谱新技术及其在疾病蛋白质组研究中的应用[D];复旦大学;2003年

相关硕士学位论文 前10条

1 何海洋;轮状病毒感染诱导MA104细胞感染相关蛋白的分析鉴定[D];第三军医大学;2007年

2 张慧芳;幽门螺杆菌对阿莫西林耐药机制的初步探索[D];山西医科大学;2007年

3 郭西良;双侧坐骨神经切断对猫脊神经节蛋白质组表达变化的实验研究[D];昆明医学院;2008年

4 郑小莉;ONO-AE-248诱发中性粒细胞非凋亡性程序化死亡的蛋白质组学研究[D];泸州医学院;2006年

5 赵亮;骨髓间充质干细胞和成纤维细胞的蛋白质组学研究[D];第四军医大学;2008年

6 于晗;幽门螺杆菌甲硝唑耐药的比较蛋白质组学初步研究[D];山东大学;2009年

7 王洁;双向电泳法测定大鼠辐照前后外周血淋巴细胞蛋白质组的差异表达[D];苏州大学;2004年

8 兰国伟;结核分枝杆菌北京家族多重耐药菌株CCDC5180、药物敏感菌株CCDC5079与BCG的蛋白质组学初步研究[D];石河子大学;2007年

9 马翔;卵细胞成熟过程蛋白质表达差异性研究[D];南京医科大学;2003年

10 李延仓;表皮干细胞的分离培养及蛋白组学研究[D];暨南大学;2008年

，

本文编号：2709858