S14G-Humanin对β-淀粉样蛋白导致小鼠海马CA1区长时程增强抑制效应的影响

发布时间：2020-06-17 12:02

【摘要】： 研究背景和目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种以隐袭起病、不可逆进行性发展的记忆减退、认知功能障碍、语言障碍及人格改变等为主要临床表现的中枢神经系统变性疾病,是临床上最为常见的老年痴呆类型。AD病因尚不完全明确,普遍认为β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在脑内聚集、纤维化、沉积、Aβ斑块形成及其毒性作用是AD发病的重要病理基础。而现有研究证明,可溶性Aβ在AD发病早期对神经元突触功能的损伤是AD发病的早期关键性病理过程,并与AD发病早期轻度认知功能障碍密切相关。Humanin(HN)是日本学者在AD患者枕叶内发现的一种多肽,研究显示,HN及其衍生物HNG可以拮抗可溶性Aβ的神经毒性作用,进而减轻AD转基因动物模型的认知功能损伤,有望成为新的AD治疗药物,但其神经保护作用机制尚不完全明确。本实验利用平面多电极记录技术,首次从突触网络水平角度研究HNG对可溶性Aβ导致的小鼠海马CA1区突触可塑性损害的影响,将为深入研究HNG的神经保护机制提供实验依据和理论基础。实验方法: 以小鼠海马脑片为研究对象,利用平面多电极阵列记录技术(MED64系统),研究(1)Aβ25-35、HNG以及不同浓度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)与Aβ25-35共同孵育在突触网络水平上对小鼠海马CA1区基础突触传递的电生理特性的影响;(2)Aβ25-35在突触网络水平上对小鼠海马CA1区LTP的抑制作用;(3)不同浓度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)对Aβ25-35在突触网络水平上对小鼠海马CA1区LTP的抑制作用的影响。实验结果: (1)在相同刺激强度下,Aβ25-35 400 nmol/L组、HNG 400 nmol/L组、Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 100 nmol/L组、Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L组及Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 400 nmol/L组中小鼠海马CA1区突触前纤维群峰电位(presynaptic response,PrV)及场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)形成范围与正常对照组相比均无统计学差异(P 0.05); (2)以θ频率诱发LTP 60min以后,与正常对照组相比,Aβ25-35 400nmol/L组小鼠海马CA1区LTP形成范围明显缩小(P0.05),HNG 400 nmol/L组无明显变化(P 0.05); (3)以θ频率诱发LTP60min以后,Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L组小鼠海马CA1区LTP形成范围明明显缩小,与Aβ25-35 400nmol/L组相比无统计学差异(P 0.05),与正常对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L组及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L组小鼠海马CA1区LTP形成范围与Aβ25-35 400nmol/L组及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L组相比有统计学差异(P0.05),Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L组及HNG 400 nmol/L组小鼠海马CA1区LTP形成范围与正常对照组比较无统计学差异(P 0.05)。实验结论: (1)可溶性Aβ、HNG以及不同浓度HNG与可溶性Aβ共孵育在突触网络水平上对小鼠海马CA1区基础突触传递没有影响; (2)低浓度可溶性Aβ短时间孵育可以在突触网络水平上明显抑制小鼠海马CA1区LTP的形成; (3)HNG可以改善甚至逆转可溶性Aβ对在突触网络水平上对小鼠海马CA1区LTP的抑制作用。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R749.16
【图文】：

波形,单电极,海马脑片,电极位置

CA1 区电极位置以及单电极记录的典型 PrV 及 fE片与 MED64 系统 MED-P515A 电极相对位置（红、电极和记录电极）；B 正常对照组、Aβ25-35400nM β25-35400nM+HNG 100nM 组、Aβ25-35400nM+HNG 0nM+HNG 400nM 组在基础刺激强度下，单电极（图极）记录到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

波形,形成范围,电极,强度

海马脑片 CA1 区电极位置以及单电极记录的典型 PrV 及 fEPSPA 海马脑片与 MED64 系统 MED-P515A 电极相对位置（红、黄箭头所别为刺激电极和记录电极）；B 正常对照组、Aβ25-35400nM 组、HNGnM 组、Aβ25-35400nM+HNG 100nM 组、Aβ25-35400nM+HNG 200nM 组β25-35400nM+HNG 400nM 组在基础刺激强度下，单电极（图 1A 中黄头所指电极）记录到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

【参考文献】