杏仁核和海马的神经再生在WKY大鼠抑郁样行为中的作用研究

发布时间：2020-07-15 20:39

【摘要】：目的:观察杏仁核和海马齿状回(dentate gyrus,DG)神经干细胞的增殖和分化对成年Wistar Kyoto(WKY)大鼠抑郁样行为的影响。方法:本实验共分三个组:(1)正常对照(Wistar)组:选取9周龄Wistar大鼠,给予生理盐水3周;(2)抑郁模型(WKY)组:选取同龄WKY大鼠并经行为学测定后筛选出抑郁大鼠作为抑郁模型组,给予生理盐水3周;(3)阳性对照(AMI+WKY)组:选取同龄WKY抑郁大鼠,给予阿米替林3周。选用免疫荧光染色细胞增殖标记物Ki67、未成熟神经元标志物DCX(doublecortin,微管相关蛋白)检测大鼠的杏仁核和海马神经再生水平;应用糖水偏好实验(Sucrose preference test,SPT)、旷场实验(Open-field test,OFT)和强迫游泳实验(Forced swimming test,FST)检测各组大鼠的抑郁样行为学变化。结果:(1)WKY抑郁大鼠杏仁核的细胞增殖标记物Ki67~+细胞数和未成熟神经元标志物DCX~+细胞数较Wistar大鼠分别降低了35.01%(P0.01)和34.06%(P0.01);类似地,其海马DG区的Ki67~+细胞数和DCX~+细胞数较正常对照组分别降低了32.88%(P0.01)和39.23%(P0.01)。(2)与抑郁模型组大鼠相比,阿米替林给药后使杏仁核的细胞增殖标记物Ki67~+细胞数和未成熟神经元标志物DCX~+细胞数分别增加了26.76%(P0.05)和37.92%(P0.01);类似地,阿米替林对照组海马DG区Ki67~+细胞数和DCX~+细胞数较抑郁模型组大鼠分别增加了43.11%(P0.01)和46.68%(P0.01)。(3)与Wistar大鼠相比,WKY抑郁大鼠糖水偏好程度明显降低(P0.01),旷场实验中运动总距离和中心停留时间显著减少(P0.01),强迫游泳实验中不动时间明显延长(P0.01)和游泳时间明显缩短(P0.01);阿米替林治疗可显著改善WKY大鼠的上述抑郁样行为。结论:(1)成年WKY抑郁大鼠的杏仁核及海马神经干细胞的增殖和分化能力较正常对照组显著降低,提示成年WKY抑郁大鼠的神经再生受损;(2)改善杏仁核和海马受损的神经再生可以部分逆转成年WKY大鼠的抑郁样行为。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R749.4
【图文】：

实验流程,强迫游泳实验,水合氯醛

好实验在给药的第16-18天进行，旷场实验在第19天进行，强迫游泳实验在第20-21天进行。在第22天，用4%水合氯醛将大鼠麻醉并处死，然后进行免疫荧光实验。图1. 实验流程图图注：糖水偏好实验(Sucrosepreferencetest,SPT)，旷场实验(Open-fieldtest,OFT)，强迫游泳实验(Forced swimming test, FST)。1.4 免疫荧光实验1.4.1 灌注行为实验结束后的第二天，使用 4%水合氯醛（1ml/100g）对大鼠进行腹腔麻醉。麻醉好后，使用医用胶带将大鼠四肢固定在手术台上。从胸骨剑突处剪开腹部，向上剪至完全暴露心脏。手持输液针从心尖处进针，插至升主动脉，固定输液针。打开调

柱状图,杏仁核,大鼠,免疫荧光染色

10图 2 比较三组大鼠杏仁核神经干细胞增殖数：图 A 是各组大鼠杏仁核的 Ki67 免疫荧光染色的代表性图片；图 B 是各组大鼠杏仁胞增殖数的柱状图。Ki67 是一种增殖相关的核抗原，表达呈红色；DAPI 标记细胞核色。阿米替林（Amitriptyline,AMI），**P < 0.01 vs. Wistar，#P < 0.05 vs. WKY

柱状图,免疫荧光染色,柱状图,代表性

11图 3 比较三组大鼠海马 DG 区神经干细胞增殖数：图 A 是各组大鼠海马 DG 的 Ki67 免疫荧光染色的代表性图片；图 B 是各组大鼠海经干细胞增殖数的柱状图。Ki67 是一种增殖相关的核抗原，表达呈红色；DAPI 标记细呈蓝色。阿米替林（Amitriptyline,AMI），**P < 0.01 vs. Wistar，##P < 0.01 vs. WKY

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