分子模拟研究老年痴呆致病蛋白结构以及基于酶结构的药物设计

发布时间：2020-08-07 00:52

【摘要】： 老年痴呆症(Alzheimer disease，AD)是一种与年龄相关的神经退化性疾病，也是严重危害人类健康的疑难杂症之一，现已确认该疾病在脑部有三个标志性病理特征：(1)出现淀粉样蛋白Aβ斑点；(2)神经纤维缠结；(3)轴突、树突退化。到目前，医学界和科学界仍然未能找出确切的病因以及行之有效的治疗方法。本文通过分子模拟手段针对AD两个公认的、主要的致病机理进行了深入研究。致病机理之一是在神经冲动传输过程中缺乏乙酰胆碱，乙酰胆碱酯酶能分解乙酰胆碱，因而成为一个被广泛关注的靶分子。抑制剂型AD药物就是基于抑制乙酰胆碱酯酶分解乙酰胆碱从而延长乙酰胆碱的作用、增强记忆而设计的，本文基于胆碱酯酶的三维结构进行了探索性的抑制型先导药物的设计；AD另一个致病机理是在大脑神经元外出现老年脑斑，该脑斑具有神经毒性，它的蔓延将导致神经元萎缩、坏死。研究表明是淀粉样Aβ多肽逐渐聚集、纤维化并与其它相关蛋白质、聚糖等共沉淀形成了脑斑，诱导Aβ多肽凝聚的可能因素很多，本文着重探讨了锌离子的诱导机理。围绕上述两个方面我们利用分子模拟手段具体完成如下工作： 1．他克林(Tacrine)是第一个上市的能减轻AD症状的抑制型药物，但它对肝脏、胃肠有极大的损害。为了寻找更有效、毒性低的他克林衍生物，我们建立了一种计算结合自由能的新方法，来评价和预测先导药物的活性。预测结合自由能的计算公式如下： ΔG_(bind)是体系结合自由能，G_(complex)是复合物的绝对自由能，G_(protein)是未结合抑制剂的蛋白质绝对自由能，G_(inh+water)被溶剂化的抑制剂绝对自由能，G_(water)溶剂水的绝对自由能。(ΔG_(inh))_(protein)是抑制剂在蛋白环境下的自由能，(ΔG_(inh))_(water)是抑制剂在水溶液环境下的自由能。根据以上公式ΔG_(bind)近似相当于抑制剂从水环境到蛋白环境的自由能变化。对8个他克林衍生物与乙酰胆碱酯酶的结合自由能ΔG_(bind)进行计算，所得结果和生物活性logIC_(50)值进行回归分析，其R~2=0.73，证摘要明了这种新方法的可行性。 2.石杉碱甲杂合体(HuPrineX)是第二代最具潜力的能减轻AD症状的先导化合物之一。为了节省计算机资源、加快对衍生物活性排列顺序的预测，本文进一步改进了计算结合自由能的方案，定义结合自由能由三部分组成:抑制剂和靶酶的相互作用能(Einter);活性位点残基在结合前后的构象绝对自由能的变化 (△GPr。);抑制剂从稳定构象变为活性构象的自由能增加值(△Ginh)。通过计算 14个HuPrineX衍生物的结合自由能，结果显示理论值和实验活性值有很好的等级相关性，其斯皮尔曼相关系数为0.85。而且，我们将该方法应用于HuPrinex 衍生物的药效基团的改造，获得了几种在理论上预测很有活性的先导化合物。 3.体外实验发现在生理浓度条件下锌离子有很强的诱导Ap多肤聚合的能力。为了探讨锌离子的诱导机理，本文首次通过分子模拟方法研究了在不同环境下锌离子和A爪10一21)多肤的键合模式。计算结果显示在可溶键合模式中，锌离子被包容在由组氨酸残基Hisl4的咪哇N:、肤链主链上的拨基氧以及两个水分子氧形成的四面体络合物中:在纤维化过程中，锌离子可能通过Hisl3(N劝一znZ十一HIS14(N劝桥键将相邻的、不同Ap多肤交叉连接形成纤维束。总之，本文建立的结合自由能的计算方法将对乙酞胆碱酷酶抑制型药物的设计、合成提供有力的帮助;而对锌离子参与下Ap斑点核形成的可能过程的预测，将为实验揭示锌离子参与下Ap多肤的变构以及斑点核形成过程提供有益的启发。
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R749.1;TQ460
【图文】：

组合图

病理特征组合图

示意图,示意图

大脑组织分布示意图

示意图,胆碱,递质,信号作用

(外周和中枢)的突触或神经节囊泡中，随着神经动作电位的来临，乙酞胆碱分子被释放出来，扩散过突触间隙以后，和受体结合引起突触后膜去极化而改变电位来传递信号，如图1.3。在生命体系中，乙酞胆碱详细的生物化学代谢过程见图1.4，乙酞胆碱首先被转乙酞酶合成并存于轴突囊泡。释放后大部分被相邻神经元膜上磷脂层内的一种螺旋型受体(卷曲蛋白)接受(如图1.5)，然后引起一系列的胞内生物化学变化，形成电信号继续向下传递:少部分激活胆碱体系中的两种蝇碱受体(Museariniereeeptor):MI和MZ，以激活或阻断细胞中的一系列乙酞胆碱的反应来调节记忆和疼痛，MZ存在突触前，Ml存在于突触后[’51。乙酞胆碱最后被乙

【引证文献】