神经保护肽重组慢病毒对实验性痴呆大鼠治疗作用及机制的研究

发布时间：2020-09-15 18:33

　　 本研究验证经鼻—脑通路给予神经保护肽(NAP)对实验性痴呆大鼠的神经保护作用,为老年性痴呆治疗提供新的途径;进而应用蛋白质组学技术研究NAP对实验性痴呆大鼠海马蛋白质表达的影响,筛选出NAP对实验性痴呆大鼠具有神经保护作用的差异蛋白,为阐明NAP对实验性痴呆大鼠治疗作用的机制提供理论依据。本研究主要经鼻-脑通路给予神经保护肽(NAP)验证对实验性痴呆大鼠的神经保护作用。将凝聚态的Aβ1-40联合应用转移生长因子β1(TGFβ1)注入实验大鼠左侧海马区制备实验性痴呆动物模型:通过Morris水迷宫定位航行实验检测大鼠记忆能力;通过HE染色观察各组大鼠海马区的形态学改变;通过原位杂交的方法检测实验各组大鼠海马区NF-κBmRNA,caspase3mRNA表达的变化。应用蛋白组学方法筛选出NAP对实验性痴呆大鼠具有神经保护作用的差异蛋白。本研究得到如下结果:痴呆组大鼠的记忆能力明显下降,rLent/NT4-NAP组大鼠较痴呆组大鼠记忆能力明显改善;HE染色发现痴呆组大鼠左侧海马区神经细胞明显变性、坏死,而rLent/NT4-NAP组细胞损伤情况较痴呆组大鼠明显减轻;检测痴呆组大鼠左侧海马区神经细胞胞浆内NF-kBmRNA, caspase3mRNA强阳性表达,而rLent/NT4-NAP组左侧海马区神经细胞胞浆内NF-kBmRNA, caspase3mRNA表达较痴呆组显著减少。通过质谱鉴定和数据库检索,鉴定出有5种蛋白质表达水平发生变化。分别为膜联蛋白A5、谷氨酸、蛋白激酶C、白细胞粘附分子、基底细胞粘附分子。本研究证明了NAP对实验性痴呆大鼠具有神经保护作用。首次应用蛋白质组学的方法研究了NAP对实验性痴呆大鼠脑内蛋白质表达的影响,发现膜联蛋白A5、谷氨酸、蛋白激酶C三种蛋白均参与了神经退行性疾病神经元细胞的凋亡,为研究NAP治疗老年性痴呆的作用机制提供了理论依据。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R749.1
【部分图文】：

图 1 对照组大鼠海马神经元病理学 图 2 假手术组海马神经元病理学HE 染色结果（×400） HE 染色结果（×400）Picture 1 control group rat hippocampus neuronic Picture 2 sham operated group rat hippocampuneuronic HE pathology dyeing (×400） HE pathology dyeing (×400）图 3 痴呆组大鼠海马神经元病理学 图 4 rLent/NT4-NAP 组大鼠海马神HE 染色结果（×400） 经元病理学 HE 染色结果（×400）Picture 3 dementia group rat hippocampus neuronic Picture4 rLent/NT4-NAP group rat hippocampuHE pathology dyeing (×400） neuronic HE pathology dyeing (×400）

图 1 对照组大鼠海马神经元病理学 图 2 假手术组海马神经元病理学HE 染色结果（×400） HE 染色结果（×400）Picture 1 control group rat hippocampus neuronic Picture 2 sham operated group rat hippocampuneuronic HE pathology dyeing (×400） HE pathology dyeing (×400）图 3 痴呆组大鼠海马神经元病理学 图 4 rLent/NT4-NAP 组大鼠海马神HE 染色结果（×400） 经元病理学 HE 染色结果（×400）Picture 3 dementia group rat hippocampus neuronic Picture4 rLent/NT4-NAP group rat hippocampuHE pathology dyeing (×400） neuronic HE pathology dyeing (×400）

图 1 对照组大鼠海马神经元病理学 图 2 假手术组海马神经元病理学HE 染色结果（×400） HE 染色结果（×400）Picture 1 control group rat hippocampus neuronic Picture 2 sham operated group rat hippocampuneuronic HE pathology dyeing (×400） HE pathology dyeing (×400）

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 杨宇;吴江;杨欣;孙欣;吴昊;王全颖;杨广笑;;携强绿色荧光蛋白重组慢病毒的构建及其在原代培养SD大鼠皮层神经细胞中的表达[J];吉林大学学报(医学版);2007年02期

2 吴昊;吴江;杨宇;孙欣;杨广笑;王全颖;;携带信号肽NT4-GFP-穿膜肽Ant融合基因的重组腺相关病毒载体的构建及意义[J];吉林大学学报(医学版);2007年05期

3 李娜;王利民;;人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆的影响[J];滨州医学院学报;2007年05期

4 徐巳奕,包映晖,江基尧;神经营养因子与血脑屏障的研究进展[J];中华神经医学杂志;2005年01期

5 南国星,贾军,孙正义,王宏沛,陈长瑞;大鼠脊髓压迫损伤减压后钙离子和兴奋性氨基酸的变化[J];第四军医大学学报;2003年01期

6 杨国锋,王鲁宁,赵馨,聂永慧;海马注射淀粉样蛋白β大鼠与正常大鼠脑蛋白质组双向电泳图谱比较[J];第一军医大学学报;2004年05期

7 朱林燕,冯鉴强;星形胶质细胞胞质[Ca~(2+)]i振荡的研究进展[J];解剖学研究;2004年03期

8 赵琳;魏敏杰;金万宝;;维生素E在阿尔茨海默病防治中的研究进展[J];国外医学(老年医学分册);2005年05期

9 时新艳,张小林,李富慧;西比灵治疗老年期痴呆疗效观察[J];河南实用神经疾病杂志;2000年05期

10 刘卫刚;冯亚青;刘蓉辉;赵大卫;刘桂芳;田瑞振;哈志远;;阿尔茨海默病患者空腹血糖和真胰岛素与载脂蛋白E基因型的分析[J];中华老年心脑血管病杂志;2007年05期

本文编号：2819316