Con-G类似物对吗啡依赖小鼠纹状体神经元凋亡及影响机制的研究

发布时间：2020-09-25 21:43

　　 1目的：从神经元凋亡角度探讨吗啡依赖的可能机理,研究Glu-Con-G、Glu-Con-G[1-13]对吗啡躯体依赖的干预作用及可能机制。 2方法：采用条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)和躯体依赖模型,利用透射电子显微镜、免疫印迹法检测成瘾小鼠纹状体脑区神经元的凋亡情况及相关蛋白含量变化。 3结果： 1.吗啡诱导小鼠CPP建立和复燃阶段纹状体脑区神经元核固缩变形,染色质边集,CPP消退阶段神经元未出现显著异常,但有异常溶酶体出现。 2.吗啡诱导小鼠CPP建立、消退和复燃阶段纹状体脑区神经元树突、轴突数量明显增多、密集。 3.吗啡诱导小鼠CPP建立、消退和复燃阶段Procaspase3蛋白含量在Hp、PFC脑区无明显变化,但在纹状体脑区于CPP建立和复燃阶段含量减少。 4.150、300、600pmol Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]呈剂量-效应依赖性方式抑制吗啡成瘾小鼠戒断跳跃,150、300、600pmol Glu-Con-G和300、600 pmol Glu-Con-G[1-13]还能抑制小鼠体重减轻症状。 5.150、300、600pmolGlu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]均能显著上调吗啡成瘾小鼠纹状体脑区Procaspase3蛋白含量。 4结论： 1.多次吗啡处理,可导致小鼠纹状体脑区在CPP建立、复燃阶段出现异常凋亡,CPP消退阶段未见显著凋亡但有异常溶酶体出现。 2.长期吗啡处理上调纹状体脑区神经元突触数量,树突、轴突密集,下调Procaspase3蛋白含量。 3. Glu-Con-G和Glu-Con-G[1-13]能干预吗啡所致小鼠躯体依赖,并能上调纹状体脑区Procaspase3蛋白含量,且呈剂量相关性。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R749.6
【部分图文】：

示意图,计算机自动分析,视频跟踪,实验系统

1.3主要实验装置及仪器1.3.1视频跟踪一计算机自动分析的条件位置偏爱实验系统的构建系统硬件组成:主要由铝扣板隔音箱(规格:160x110x11ocm)、小鼠活动盒、摄像系统和专用计算机组成。隔音箱顶部装有排风扇(新风系统)，背景噪音<30dB;发光二极管(LED)照明设备，亮度调至活动盒底部平均照度<20Lux;正中为摄像头，通过视频线连接到一个装有视频采集卡的计算机，能同步观察小鼠的活动情况，并摄像保存。对位于摄像头正下方的小鼠CPP活动盒在Becker等人的基础上做了一定的改进【”]，是由4个相同的长方形Pvc材料穿梭盒(30火15、15cm)组成的正方形盒子(45x45x45cm)。每一穿梭盒中间有一可活动的隔板(训练阶段为封闭型，测试阶段为通道型)，将穿梭盒分隔为两个大小相同的正方形盒子(巧、巧、巧cm)，其中一个盒子四周均为白色，底面光滑;另一个四周均为黑色，底面镂刻成网格(o‘5x0.5cm)。

界面图,软件,界面,小区

宙睡g只冷卜”.宁一一能 111图2.Ra灯 MieeTrac址ng软件的分析界面 Figure2.TheinterfaeeofRat/MieeTraekingsoftware视频图像分析主要原理:录像前用饱和苦味酸溶液将小鼠涂成黄色，以区别其所在活动盒的背景色(黑色和白色)， Rat/MiceTracking软件即可对小鼠进行实时跟踪分析。打开背景灰度均匀并且和小鼠有较大对比度的视频文件后，区域新建时沿活动隔板上缘将区域分成两小区。两小区再分别划定为中心和周边两部分区域，中心圆形区域面积大小为小区面积的1/4。在跟踪小鼠运动轨迹时，根据设置好的灰度范围，计算出各个区域(活动区室)在此灰度范围内的点(可以是多个)，选择面积最大的点并取重心即为小鼠在此帧图像的轨迹点。定位判断每帧图像中小鼠轨迹点所在小区。先后相邻轨迹点在两个小区

示意图,小区,离心机,弗隆

图3.分别在两个小区的先后相邻A、B两点示Figure3.SehematiediagramofadjaeentAandBPointsloeat1.3.2其他仪器DS一PAGE电泳转膜装置标仪(ELX一800)BIO一量移液器E织匀浆机Bi速低温离心机(eent八允ge5804R)E速离心机(eenth允ge5415n)E低温冰箱(PremiumU410)H计(nELI，A32o)Mett功能漩涡振荡器Gen泰凯弗隆超纯水仪上

【参考文献】