GPR30在去势合并慢性应激大鼠海马神经元损伤中的作用及对PSD95的影响研究

发布时间：2020-10-19 17:09

　　 目的观察海马神经元损伤情况及雌激素膜受体G蛋白耦联受体30(G-protein coupled receptor 30,GPR30)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化的蛋白激酶B(phospho-Akt,pAkt)及突触后致密蛋白95(Postsynaptic density protein 95,PSD95)在去势合并慢性应激大鼠海马中的表达,了解雌激素保护海马神经元的作用机理。方法选择雌性SD(Sprague Dawley)大鼠,随机分为空白对照组、应激+假手术组、DMSO组、去势+应激模型组、去势+应激+17β-雌二醇共价衍生物(E2-BSA)组及去势+应激+E2-BSA+G15组,每组12只。空白对照组不去势,应激+假手术组和DMSO组只做去势假手术,去势+应激模型组、去势+应激+E2-BSA组和去势+应激+E2-BSA+G15组做去势手术。空白对照组不做侧脑室定位手术,应激+假手术组只颅顶切开皮肤、钻孔,不做侧脑室定位术,DMSO组、去势+应激模型组、去势+应激+E2-BSA组和去势+应激+E2-BSA+G15组做侧脑室定位术。空白对照组和DMSO组大鼠正常饲养,DMSO组每天给予0.5%的DMSO溶液5μL;应激+假手术组、去势+应激模型组、去势+应激+E2-BSA组和去势+应激+E2-BSA+G15组给予慢性不可预知性应激,每天选择一种,同一种刺激不可连续给予,使其不可预知,同时去势+应激+E2-BSA组和去势+应激+E2-BSA+G15组给予相应药物干预,持续28d。旷场实验和2%蔗糖溶液消耗实验用于检测大鼠行为变化,尼氏染色观察海马神经元形态变化,免疫组织化学检测海马GPR30、PSD95和pAkt蛋白阳性表达,Western blot检测海马GPR30、Akt、pAkt及PSD95蛋白阳性表达。结果1旷场实验结果显示:去势+应激模型组与空白对照组和应激+假手术组相比旷场实验得分均减少。给药第四周,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组旷场实验得分下降。2 2%蔗糖溶液消耗量结果显示:给药第四周,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组2%蔗糖溶液消耗量下降。3尼氏染色显示:去势+应激+E2-BSA组海马神经元细胞形态完整,细胞排列规整,尼氏体较多;去势+应激模型组海马神经元细胞排列散乱,尼氏体减少;去势+应激+E2-BSA+G15组海马神经元形态不完整,染色浅,尼氏体较少。4免疫组化结果显示:(1)GPR30蛋白主要表达在海马神经元胞膜和胞浆内,细胞核内未见。在海马神经元CA3和DG区,与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组GPR30蛋白表达下降。(2)PSD95蛋白在海马神经元各区,与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组表达下降;与去势+应激模型组比较,去势+应激+E2-BSA组表达升高。(3)pAkt蛋白在海马神经元各区,与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组表达下降;与去势+应激模型组比较,去势+应激+E2-BSA组表达升高。5 Western blot结果显示:(1)与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组GPR30蛋白表达下降。(2)与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组PSD95蛋白表达下降。(3)与空白对照组比较,去势+应激模型组和去势+应激+E2-BSA+G15组pAkt和Akt蛋白相对表达量下降。结论1 E2-BSA干预可减轻去势合并慢性应激SD大鼠海马神经元的损伤。2 E2-BSA干预可使去势合并慢性应激SD大鼠海马神经元的GPR30和PSD95蛋白阳性表达增加。3 E2-BSA可通过GPR30激活Akt信号通路使PSD95蛋白阳性表达增加,可能是雌激素发挥神经元保护作用的机理之一。
【学位单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R749.4

【参考文献】

相关期刊论文 前9条

1 李漾超;李云;李姝;杨宁;;脑卒中后抑郁大鼠额叶、海马、杏仁核神经元数量变化[J];山东医药;2017年19期

2 梁芯;唐静;张杨;陈林木;王飞飞;谭川雪;蒋林;黄春霞;高原;罗艳敏;肖倩;晁凤蕾;綦英强;朱殷青;唐勇;;抑郁症CUS模型大鼠海马CA1区及CA3区内树突棘数目减少[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2016年01期

3 马学萍;安书成;;慢性应激性抑郁发生中海马糖皮质激素对BDNF的影响[J];陕西师范大学学报(自然科学版);2013年06期

4 杜旭;王瑞辉;;电针对脊髓损伤大鼠尼氏体和神经功能的影响[J];时珍国医国药;2011年04期

5 穆道周;申国明;;雌激素的抗抑郁作用及机制研究进展[J];天津医药;2010年10期

6 郭秀娟;王静敏;牛争平;;突触后致密蛋白-95在离子型谷氨酸受体转运中的作用[J];山西医科大学学报;2010年04期

7 赵承军;邓其跃;张东梅;蔡文琴;张吉强;;非基因型雌激素膜性受体GPR30在生后雌性大鼠海马内的发育学表达与亚细胞水平定位研究[J];生物化学与生物物理进展;2009年01期

8 胡光民;许浩;申国明;;雌激素膜受体GPR30的研究进展[J];中国现代药物应用;2008年04期

9 潘琪;牛朝诗;;蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成[J];中华神经医学杂志;2009年05期

相关博士学位论文 前1条

1 黄春霞;抑郁症慢性不可预知应激模型大鼠海马结构有髓神经纤维髓鞘改变及氟西汀对其的影响[D];重庆医科大学;2015年

相关硕士学位论文 前1条

1 檀军丽;体外研究GPR30-PI3K/Akt信号通路在三阴性乳腺癌转移中发挥作用的机制[D];河北医科大学;2017年

本文编号：2847482