人脐血细胞静脉输注对血管性痴呆大鼠治疗作用的研究

发布时间：2020-10-30 17:22

　　 背景与目的: 哺乳动物中枢神经系统(central neural system,CNS)受损后的修复是有限的,受损的神经元几乎不能再生。目前,越来越多的研究将精力集中在细胞移植治疗脑和脊髓病变方面。胚胎干细胞移植是治疗CNS疾病最有希望的手段之一,但其广泛应用受到组织来源、免疫排斥及伦理学等诸方面的限制。骨髓干细胞在体外经过一定条件培养可以表达nestin抗原并可以分化为神经元和胶质细胞。骨髓干细胞已经在CNS疾病如脑缺血及外伤等治疗方面得到了应用。将骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)移植到受损动物的CNS可以生长成为神经元。与骨髓及外周血相比,脐血具有免疫原性弱、淋巴细胞不成熟、来源丰富、易于采集及保存、无肿瘤细胞污染等优点。脐血较骨髓含有更多的干细胞,而且这些干细胞更原始,提示脐血源性干细胞比骨髓源性干细胞更有治疗应用价值。目前也有报道将人脐血细胞(human umbilical cord blood cells,HUCBCs)移植到CNS受损(如脑缺血或脊髓损伤)的动物模型中,从组织学及行为学改善方面证实了其有效性。血管性痴呆(vascular dementia,VaD)是指由于脑血管疾病引起的脑组织梗塞、低灌注或出血所致的认知功能损害综合征。目前,VaD成为老年期痴呆的第二大病因,仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)。随着人口老龄化和脑血管疾病发病率的上升,VaD的发病率也逐年上升。但对于VaD尚无特效治疗方法。为此,本实验拟初步观察HUCBCs静脉输注对VaD大鼠行为和认知功能的改善以及对脑组织保护及修复方面的作用。 方法: 1.脐血的采集和分离 选取健康无感染性疾病产妇,正常分娩的健康婴儿做为脐血采集对象。采取健康成人外周血作为对照组。脐血与外周血均采集10份。以淋巴细胞密度梯度分离法对细胞进行分离。 2.细胞鉴定 采集脐血,分离HUCBCs,对其进行nestin阳性细胞鉴定。以成人外周血细胞(Human peripheral blood cells,HUPBCs)作为对照组。以免疫细胞化学的方法对HUCBCs中nestin阳性细胞进行定性检测。采用流式细胞术对脐血细胞中
【学位单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2005
【中图分类】：R749.16
【部分图文】：

免疫细胞化学检测，HUCBCs组可见nestin阳性染色细胞(见照片5)，H阳性染色细胞。流式细胞仪检测显示人脐血nestin阳性细胞占HUCBCs%士0.66%，HUPBCs未检测出阳性细胞。流式细胞仪(Multieyele软件)对析显示HUCBCs处于S期(分裂期)的细胞数明显高于HUPBCs;而HGoll期(静止期)的细胞明显少于HUPBCs，两组数据均有显著差异(P<.BCs处于GZ舰期的细胞高于HUPBCs，但无显著差异(尸>0.05)。表1脐血、外周血各期细胞比率n(二10)(%)Table1TheratioofHUCBCs’andHUPBCs’eelleyele(n=10)(%)G110HUCBCS0士33士3HUPBCs94.8士2.33.8士1.71.3士1.2*p<0.01，ComParedwithHUPBCs

CF的阴性对照FigZ:FCMnaalysesofHUCBCs:negativeeonrto图3:FCM检测HUCBCs中nestin细胞含量的阳性结果:nestin阳性细胞占4.8%Fig3:FCMnaaylsesofHUCBCs:TheeellsePxersswasabout4.8%.图4:FCM检测的HUPBCs的细胞周期:图5:FcM检测的HUCBCs的细胞周期:

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本文编号：2862782