甘露醇对骨髓充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠行为学与海马胆碱能系统的影响

发布时间：2020-12-27 20:02

　　第一部分血管性痴呆大鼠模型的制备【目的】探讨制备理想的血管性痴呆（VD）动物模型方法,为研究VD提供理想的动物模型。【方法】将通过筛选的大鼠随机分为假手术组与模型组。假手术组仅切开颈部皮肤,不结扎颈总动脉;模型组采用间隔3天先后分别结扎双侧颈总动脉的方法制备VD大鼠模型,造模术后4周用Morris水迷宫对两组大鼠进行行为学检测。【结果】造模术后4周,模型组大鼠的成活率52.17%,成模率91.43%。行为学检测结果表明,血管性痴呆模型大鼠有明显的学习记忆障碍。【结论】采用改良后的双侧颈总动脉结扎法制备VD大鼠模型,具有高成模率、较高成活率、高重复性、痴呆症状稳定等优点,可以为VD的基础研究提供理想的动物模型。第二部分大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定【目的】体外培养符合实验要求的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）并进行鉴定,为进行细胞移植提供一定数量且功能稳定的种子细胞。【方法】无菌条件下取幼年雄性SD大鼠的股骨,采用全骨髓培养结合细胞贴壁法分离纯化BMSCs。待细胞生长铺满塑料瓶底80%-90%左右时,用2.5g/L胰蛋白酶控制消化120S后,按1:2进行扩增传代。倒置相差显微镜... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

血管性痴呆大鼠模型制Fig12-VOtoestablishtheVDmodle

水点入水训练各1次，取其平均值为其每天逃避潜伏期。若大鼠在60s内找到平台，让其在平台上站立10s，若未找到，需要将其引上平台，并让其站立10s，潜伏期记为60s。（2）空间探索试验，用于测量大鼠学会寻找平台后,对平台空间位置记忆的能力。即第6d撤去平台，大鼠固定从某一象限入水，记录60s内其在原平台象限的滞留时间。观察指标：(l)逃避潜伏期；(2)平台象限滞留时间。

互相融合，基本铺满瓶底，呈长梭形，伸出长短不一， 粗细不均的突起，胞核大、 核仁清晰（图 7）。约 14 d 细胞融合 80% ～90%时，进行传代。传代细胞比原代细胞贴壁快， 2 小时后可见细胞开始贴壁，随着时间的延长，贴壁细胞不断增加，24 小时内已全部贴壁、 伸展 ,增殖迅速 ,均匀分布生长 , 6～7d 可见长梭形细胞 80%～90%铺满培养皿形成单层。倒置显微镜下观察，贴壁初期细胞形状多样，有圆形的、多角形的梭形的等。随着细胞的生长增值，BMSCs 形态渐渐趋于纺锤形，排列有序呈鱼群样或漩涡状排列（图 8）。以后根据生长情况每隔 6～7d 传代一次。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2942395