miR-30c-5p和miR-3963在抑郁症发生发展中作用及机制研究
发布时间:2021-01-30 04:28
[研究背景]抑郁症是导致全球疾病负担的主要因素之一[1],影响了美国大约17%的人口。它给个人造成了巨大的苦难和给社会造成经济负担[2]。此外,由于抑郁症会带来高自杀的风险性,抑郁症可能是一个致命的疾病[3],同样会带来心脏病,脑血管疾病和其他医疗原因导致的死亡率增加的风险。据最新的中国疾病预防控制中心调查报告显示,在中国抑郁症的患者人数占到了总人口的4%,这些事实证明,抑郁症已经成为危害我国人民生活质量和身体健康的主要疾病之一。目前普遍认为遗传、免疫炎症和环境因素之间复杂的相互作用导致了抑郁症的发生,这些因素决定了个体对情感障碍的相对易感性。但是其发病机制和治疗途径至今仍未被完全阐明。主要研究集中在体内5-HT、去甲肾上腺素、多巴胺等单胺类神经递质传导水平低下导致抑郁症状。目前可用的抗抑郁药物,单独和联合使用,都与部分高反应性或无反应性有关,延迟反应数周至数月,药效持续时间有限[4]。由于缺乏对抑郁症的病理生理学特征的了解,近年来,世界范围内的大批科研工作者通过对抑郁症发病机理的探寻、研究,正在积...
【文章来源】:中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】:110 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略语表
摘要
ABSTRACT
前言
文献回顾
第一部分 CUMS模型小鼠的建立
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要器械
1.3 试剂
2 实验方法
2.1 动物模型建立
2.2 行为学检测
2.3 化学试剂配制
2.4 制备样品
2.5 Western blot
2.6 数据分析
3 结果
3.1 CUMS模型小鼠在旷场实验中央活动时间减少
3.2 CUMS模型小鼠高架十字迷宫实验结果显示在开臂活动时间减少
3.3 CUMS模型小鼠的强迫游泳和悬尾不动时间增加
4 讨论
第二部分 MICRORNA高通量筛选以及RT-PCR的验证
1 材料
1.1 实验动物
1.2 实验试剂
1.3 主要实验仪器
2 方法
2.1 miRNeasy Kit进行组织microRNA纯化
2.2 芯片实验QC
2.3 芯片扫描
2.4 差异miRNAs挑选
2.5 实时定量PCR检测miRNA表达水平
2.6 数据处理
3 结果
3.1 实验结果
3.2 芯片扫描结果
3.3 差异miRNAs挑选
3.4 实时定量PCR验证芯片结果
4 讨论
第三部分 MIR-30C-5P和MIR-3963调节CUMS小鼠在杏仁核的作用
1 材料
1.1 实验动物
1.2 仪器
1.3 试剂
2 方法
2.1 CUMS模型的建立
2.2 RNAoligo合成
2.3 动物分组
2.4 组织免疫荧光
2.5 旷场实验
2.6 高架十字迷宫
2.7 强迫游泳实验
2.8 悬尾实验
3 结果
3.1 RNA合成
3.2 脑定位显示荧光标记
3.3 miR-30c-5p和miR-3963在CUMS小鼠杏仁核作用
4 讨论
第四部分 靶基因验证
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要器械
1.3 主要试剂
2 方法
2.1 动物模型
2.2 预测数据来源和策略
2.3 western blot验证
3 结果
3.1 microRNA—靶基因网络图
3.2 靶基因特异性筛选结果
3.3 基因本体(Gene Ontology)的分析
3.4 microRNA-预测靶基因调控网络的构建
3.5 mRNA水平验证
3.6 靶蛋白western blot结果
4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]Peptides from adipose tissue in mental disorders[J]. Andrzej W?drychowicz,Andrzej Zaj?c,Maciej Pilecki,Barbara Ko?cielniak,Przemys?aw J Tomasik. World Journal of Psychiatry. 2014(04)
本文编号:3008237
【文章来源】:中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校
【文章页数】:110 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
缩略语表
摘要
ABSTRACT
前言
文献回顾
第一部分 CUMS模型小鼠的建立
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要器械
1.3 试剂
2 实验方法
2.1 动物模型建立
2.2 行为学检测
2.3 化学试剂配制
2.4 制备样品
2.5 Western blot
2.6 数据分析
3 结果
3.1 CUMS模型小鼠在旷场实验中央活动时间减少
3.2 CUMS模型小鼠高架十字迷宫实验结果显示在开臂活动时间减少
3.3 CUMS模型小鼠的强迫游泳和悬尾不动时间增加
4 讨论
第二部分 MICRORNA高通量筛选以及RT-PCR的验证
1 材料
1.1 实验动物
1.2 实验试剂
1.3 主要实验仪器
2 方法
2.1 miRNeasy Kit进行组织microRNA纯化
2.2 芯片实验QC
2.3 芯片扫描
2.4 差异miRNAs挑选
2.5 实时定量PCR检测miRNA表达水平
2.6 数据处理
3 结果
3.1 实验结果
3.2 芯片扫描结果
3.3 差异miRNAs挑选
3.4 实时定量PCR验证芯片结果
4 讨论
第三部分 MIR-30C-5P和MIR-3963调节CUMS小鼠在杏仁核的作用
1 材料
1.1 实验动物
1.2 仪器
1.3 试剂
2 方法
2.1 CUMS模型的建立
2.2 RNAoligo合成
2.3 动物分组
2.4 组织免疫荧光
2.5 旷场实验
2.6 高架十字迷宫
2.7 强迫游泳实验
2.8 悬尾实验
3 结果
3.1 RNA合成
3.2 脑定位显示荧光标记
3.3 miR-30c-5p和miR-3963在CUMS小鼠杏仁核作用
4 讨论
第四部分 靶基因验证
1 材料
1.1 实验动物
1.2 主要器械
1.3 主要试剂
2 方法
2.1 动物模型
2.2 预测数据来源和策略
2.3 western blot验证
3 结果
3.1 microRNA—靶基因网络图
3.2 靶基因特异性筛选结果
3.3 基因本体(Gene Ontology)的分析
3.4 microRNA-预测靶基因调控网络的构建
3.5 mRNA水平验证
3.6 靶蛋白western blot结果
4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]Peptides from adipose tissue in mental disorders[J]. Andrzej W?drychowicz,Andrzej Zaj?c,Maciej Pilecki,Barbara Ko?cielniak,Przemys?aw J Tomasik. World Journal of Psychiatry. 2014(04)
本文编号:3008237
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jsb/3008237.html
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