miR-124通过C1ql3调节APP/PS1小鼠大脑微血管功能

发布时间：2021-02-21 23:08

　　研究背景和目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种以渐进性的记忆缺失为主要临床特征的神经退行性病变。然而这些疾病发病的细胞和分子学基础至今未有定论。有研究发现在许多神经退行性疾病,如AD和帕金森病（Parkinson’s disease,PD）中,都出现了脑微血管的变化,提示这些疾病的发生可能与微血管的改变相关。甚至一些研究发现血管的变化是先于AD的其他病理改变。近年来,microRNA（miRNA）被认为是调节血管和记忆功能的关键因素,并且越来越多的研究发现,miRNA可以调节中枢神经系统的发育,并与突触可塑性有关。miR-124是大脑中丰富的miRNA,有研究发现miR-124可通过对Aβ和淀粉前体蛋白（APP）的调节来调控AD。此外,miR-124还被证明参与了多种血管疾病。但是它对AD中微血管的作用并不清楚。最近的研究发现,补体蛋白C1q在许多神经退行性病变中发挥着重要作用。本实验通过过表达miR-124或抑制C1ql3的功能,并检测小鼠行为学变化及脑中不同部位血管变化情况,确定miR-124和C1ql3对AD小鼠脑中血管的作用。方法:1、实验分... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

miR-124过表达或抑制C1ql3的表达对APP/PS1小鼠的学习和记忆功能的影响

图 3 慢病毒 GFP 在海马和颞叶皮质区的表达Overexpression of miR-124 after intracerebroventricular injection with lentivirus in AD mice: (A)Fluorescence of GFP in brain sections of AD mice. (B) Quantification of the abundance of miR-124,by RT-PCR in the cortex and hippocampus of subjects with AD and miR-124 group. (n =6; **: P <0.01;***: P < 0.001 by two-sided t test)3.4 在 APP/PS1 小鼠大脑中 C1ql3 可能存在与 miR-124 结合的潜在靶向位点miRNA 是大脑微血管不可或缺的调节因子。使用计算机软件（Targetscan）发现，C1q 的亚型之一的 C1ql3 存在与 miR-124 结合的潜在靶点（图 4A）。因此，在APP/PS1 小鼠体内下调 miR-124 可能会促进 C1ql3 的上调。qPCR 结果显示在感染miR-124 的 APP/PS1 小鼠脑中，miR-124 可以明显抑制 C1ql3 的表达（图 4B）。

图4 APP/PS1小鼠大脑中C1ql3可能存在与miR-124结合的潜在靶向位C1ql3 is the potential target of miR-124: (A) Base sequence of potential binding sitesthe mRNA of C1ql3-3’UTR. (B)Quantification of mRNA levels of C1ql3 in AD andtreatment of GFP-miR-124 (n =6; *: P < 0.05, ***: P < 0.001 by two-sided3.5 miR-124 的上调或 C1ql3 的下调对 APP/PS1 小鼠的微血响C1INH 组小鼠海马（图 5A）和颞叶皮质（图 5B）的免疫荧光结果增加，血管完整性得以恢复。miR-124 组表现出来相同的变化（图 5C）分析海马区标记成熟血管的 CD31、CD34、TIE-2 表达水平，结果显示相比，APP/PS1 小鼠的蛋白水平明显降低；miR-124 或 C1INH 组小鼠的显高于 AD 组（图 5D）。表明 C1ql3 异常升高或 miR-124 水平降低都可


本文编号：3045056