用于建立AD动物模型的重组腺相关病毒的构建、表征和筛选
发布时间：2021-02-22 00:34
阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）是一种渐行性神经退行性疾病,主要病理学特征包括β-淀粉样蛋白过度沉积形成的Aβ斑块、过度磷酸化tau蛋白（pTau）形成的神经元纤维缠结和神经元的丢失。近年来科学家们对AD的治疗策略进行了很多尝试,但到目前为止获批的AD药物均只能在一定程度上缓解病情,并不能治愈或者阻断AD病程发展。因此,临床对预防和治疗AD的新药需求极为迫切。免疫治疗手段是AD新药研发的重点,然而过去十年以Aβ或以tau为靶点的AD疫苗研究罕有成功,原因在于疫苗在人体中的安全性欠缺,且诱导产生的免疫原性不够强。另外,单独Aβ疫苗或pTau疫苗只作用于一种AD致病因子而使得疗效不佳。因此研发同时靶向AD患者脑内的Aβ蛋白和pTau蛋白的疫苗是进一步提高AD治疗效果的潜在策略。为了进一步开发针对Aβ蛋白和pTau蛋白的双靶向AD疫苗,能够同时表达两种病理蛋白的动物模型对于疫苗的治疗效果评价是非常必要的,同时这种动物模型对于探究Aβ和tau在体内的相互作用同样十分重要。但直到目前为止能够获得的同时表达两种病理蛋白的三转基因鼠中,Aβ蛋白和pTau蛋白的表达时间存在...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
rAAV电子显微镜示意图
第一章绪论7图1.1AAV病毒包装示意图引自JuanJoseAponte-Ubillus,AppliedMicrobiologyandBiotechnology2018不同的血清型在感染不同类型宿主细胞时存在差异，也就是说rAAV具有组织趋向性，这主要取决于rAAV的衣壳蛋白和被感染的细胞。在病毒进行对宿主细胞的感染过程中，包括对细胞表面受体的识别，并诱导内吞作用，进入细胞后释放并最终进入到细胞核内。病毒与细胞的这些相互作用是载体有效性的关键因素，当我们想要在特定细胞高效表达某种目的基因时。因此为了在特异组织细胞更加高效的表达所需的目的基因，选择合适的血清型至关重要。作为基因载体AAV1常被应用于肌肉、心脏、骨骼肌以及神经系统中；AAV2也被用于神经系统中；AAV5常被应用于肺、眼和神经系统；AAV6常被应用于肺、心脏、血液细胞、免疫细胞中；AAV8常被应用于肝、肌肉、眼、神经系统；AAV9常被用于肝、肺、肌肉、心脏、神经系统；DJ常被用于肝、肺、视网膜；DJ/8常被应用于肝、眼、神经系统；Retro常被应用于神经逆行示踪；Rh10常被应用于肺、肝、心脏、肌肉、中枢神经系统；PHP.eB/PHP.B/PHP.S则被用于神经跨血脑屏障。不同血清型不仅只限于在小鼠体内具有较好转导效率，还被应用于狗、猴子和人体中。
第一章绪论8图1.2不同血清型AAV在各种生物体中的应用示意图引自ArunSrivastava,CurrentOpinioninVirology2016为了实现在特异组织高效转导目的基因，除了要筛选合适的血清型意外，选择合适的注射方法也尤为重要。AAV的注射方法主要可以分为系统性注射和原位注射。系统性注射方法常见的有尾静脉注射和腹腔注射；原位注射即局部注射，需要根据需要在不同部位进行注射，如脑定位立体注射。同时相同血清型AAV在不同启动子的作用下也会显示不同的转导效率，目前以AAV为载体进行基因转导的过程中应用到的启动子类型包括数十种，其中在神经系统中被广泛应用的启动子类型包括hSyn（神经元特异性启动子）、mecp2(较短的神经元特异性启动子)、TUBA1A(早期神经元特异性启动子)、c-fos(兴奋神经元启动子)、CaMKa(前脑谷氨酸能神经元特异性启动子)、Iba1(小胶质细胞特异性启动子)、CNP(少突胶质细胞或施万细胞特异性表达启动子)。肌肉组织中常用的启动子类型包括cTNT(心肌细胞特异性启动子)、mNkx2.5(心肌细胞早期特异性启动子)、SM22a(平滑肌特异性启动子)、MCK(肌肉特异性启动子)、MCK(肌肉特异性启动子)、MYOG(成肌细胞特异性启动子)、ACTA1(肌细胞特异性启动子)。骨骼中常被应用的启动子包括COL2A1(软骨细胞特异性启动子)和mRUNX2(成骨细胞早期特异性启动子)。肺部组织常被应用的启动子是SP-C（肺上皮细胞特异性启动子）。肝脏中常被应用的启动子是TBG(肝特异性启动子)。而CAG启动子则作为一种光谱性启动子在多种组织器官中都具有较
【参考文献】：
期刊论文
[1]大学英语阅读教学中的文化导入[J]. 王颖. 科技信息. 2010(13)
[2]数字海洋[J]. 林勇. 科学. 2007(01)
[3]GATs与教育的监管框架——以中外合作办学为例[J]. 张强,张欢. 科技进步与对策. 2002(05)
[4]民营企业中的集群现象及启示[J]. 邓明然,叶建木. 科技进步与对策. 2001(08)
本文编号：3045158
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
rAAV电子显微镜示意图
第一章绪论7图1.1AAV病毒包装示意图引自JuanJoseAponte-Ubillus,AppliedMicrobiologyandBiotechnology2018不同的血清型在感染不同类型宿主细胞时存在差异，也就是说rAAV具有组织趋向性，这主要取决于rAAV的衣壳蛋白和被感染的细胞。在病毒进行对宿主细胞的感染过程中，包括对细胞表面受体的识别，并诱导内吞作用，进入细胞后释放并最终进入到细胞核内。病毒与细胞的这些相互作用是载体有效性的关键因素，当我们想要在特定细胞高效表达某种目的基因时。因此为了在特异组织细胞更加高效的表达所需的目的基因，选择合适的血清型至关重要。作为基因载体AAV1常被应用于肌肉、心脏、骨骼肌以及神经系统中；AAV2也被用于神经系统中；AAV5常被应用于肺、眼和神经系统；AAV6常被应用于肺、心脏、血液细胞、免疫细胞中；AAV8常被应用于肝、肌肉、眼、神经系统；AAV9常被用于肝、肺、肌肉、心脏、神经系统；DJ常被用于肝、肺、视网膜；DJ/8常被应用于肝、眼、神经系统；Retro常被应用于神经逆行示踪；Rh10常被应用于肺、肝、心脏、肌肉、中枢神经系统；PHP.eB/PHP.B/PHP.S则被用于神经跨血脑屏障。不同血清型不仅只限于在小鼠体内具有较好转导效率，还被应用于狗、猴子和人体中。
第一章绪论8图1.2不同血清型AAV在各种生物体中的应用示意图引自ArunSrivastava,CurrentOpinioninVirology2016为了实现在特异组织高效转导目的基因，除了要筛选合适的血清型意外，选择合适的注射方法也尤为重要。AAV的注射方法主要可以分为系统性注射和原位注射。系统性注射方法常见的有尾静脉注射和腹腔注射；原位注射即局部注射，需要根据需要在不同部位进行注射，如脑定位立体注射。同时相同血清型AAV在不同启动子的作用下也会显示不同的转导效率，目前以AAV为载体进行基因转导的过程中应用到的启动子类型包括数十种，其中在神经系统中被广泛应用的启动子类型包括hSyn（神经元特异性启动子）、mecp2(较短的神经元特异性启动子)、TUBA1A(早期神经元特异性启动子)、c-fos(兴奋神经元启动子)、CaMKa(前脑谷氨酸能神经元特异性启动子)、Iba1(小胶质细胞特异性启动子)、CNP(少突胶质细胞或施万细胞特异性表达启动子)。肌肉组织中常用的启动子类型包括cTNT(心肌细胞特异性启动子)、mNkx2.5(心肌细胞早期特异性启动子)、SM22a(平滑肌特异性启动子)、MCK(肌肉特异性启动子)、MCK(肌肉特异性启动子)、MYOG(成肌细胞特异性启动子)、ACTA1(肌细胞特异性启动子)。骨骼中常被应用的启动子包括COL2A1(软骨细胞特异性启动子)和mRUNX2(成骨细胞早期特异性启动子)。肺部组织常被应用的启动子是SP-C（肺上皮细胞特异性启动子）。肝脏中常被应用的启动子是TBG(肝特异性启动子)。而CAG启动子则作为一种光谱性启动子在多种组织器官中都具有较
【参考文献】：
期刊论文
[1]大学英语阅读教学中的文化导入[J]. 王颖. 科技信息. 2010(13)
[2]数字海洋[J]. 林勇. 科学. 2007(01)
[3]GATs与教育的监管框架——以中外合作办学为例[J]. 张强,张欢. 科技进步与对策. 2002(05)
[4]民营企业中的集群现象及启示[J]. 邓明然,叶建木. 科技进步与对策. 2001(08)
本文编号：3045158
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jsb/3045158.html
最近更新
教材专著
