CB 2 R的激活抑制Aβ 1-42 诱导的海马神经元凋亡
发布时间：2021-04-06 17:08
随着人口老龄化程度的不断增加,阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease,AD）的患病率也逐渐上升,其主要病理特征为大脑内出现大量老年斑（senile plaques,SP）,神经元内出现纤维缠结（neuronal fiber tangles,NFT）。阿尔兹海默症的具体渐上升,其主要病理特征为大脑内出现大量老年斑（senile plaques,SP）,神经病因至今尚未被解释清楚,研究表明患者的脑内Aβ1-42聚集,尤其是海马体中的Aβ1-42表达量明显增加,且与AD的进程有明显关系。抑制Aβ1-42的毒性作用可能是保护海马神经元减少损伤的重要病理机制。β-淀粉样蛋白（amyloidβ-protein,Aβ）是一种极易发生聚集的多肽,脑内的Aβ发生聚集会形成寡聚体和纤维体,其中众多的研究表明Aβ1-42寡聚体具有更强的毒性,不仅能够激活小胶质细胞引发炎症,还能直接损伤海马神经元,最终导致学习记忆能力下降。而在众多神经退行性疾病中,大脑中的大麻素受体2（CB2R）的表达均明显上升,因此认为CB2
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
β1-42处理7天诱导海马神经元凋亡Fig.1ChronicAβ1-42Aβ1-42treatmentfor7daysinducedapoptosisofhippocampalneuronsFlowcytometermeasurementsshowedachangeofcellsurvivalrateincontrol(A)andAβ1-42-treated(B)
青岛大学硕士学位论文162.慢性Aβ1-42处理诱导凋亡模型中CB2R的mRNA的变化为了检测CB2R在Aβ1-42处理的模型中的表达是否增加，我们使用qRT-PCR技术检测了海马神经元中CB2R的mRNA表达。结果显示，与对照组（无Aβ1-42处理）比较，在Aβ1-42处理的作用下，CB2R的mRNA表达明显增加，差异具有统计学意义（P<0.001）。表明CB2R在Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡中可能起到某些作用（图2）。图2，Aβ1-42诱导的海马神经元中CB2R的mRNA表达Fig2.TheexpressionofCB2RmRNAinhippocampalneuronsTheexpressionofCB2RmRNAinAβgroupwasincreasedsignificantlycomparedwithControlgroup.Datarepresentsthemean±S.E.Mof4independentexperiments（***P<0.001）3.JWH133对Aβ1-42诱导的凋亡模型的作用乳酸脱氢酶（LDH）在细胞膜受损时，会释放到细胞外，由于该酶的性质比较稳定，可以检测培养液中的LDH的含量作为确定细胞受损死亡指标。为了探讨CB2R选择性激动剂JWH133在Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡中是否起作用，我们设计了4个分组进行实验：对照组（不作任何处理），Aβ组，Aβ+JWH133组，Aβ+AM630（CB2R抑制剂）+JWH133组，所有实验组均使用Aβ处理7天，之后使用LDH试剂盒检测细胞损伤率。结果显示，Aβ组与对照组相比，细胞凋亡率明显增高(P<0.01)；使用JWH133（10μM）提前50min预处理细胞后再进行Aβ1-42处理。结果表明，Aβ+JWH133组的细胞凋亡率相比于Aβ组明显降低，差别具有统计学意义（P<0.01）；而加入CB2R受体阻断剂AM630抑制CB2R的激活后，JWH133的保护作用消失，细胞死亡率又明显升高，差异具有统计学意义（P<0.01）。结果表明，CB2R激动剂JWH133激活CB2R后可以抑制Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡（图3）。
结果17图3.CB2R激动剂JWH133抑制Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡Fig3.CB2RagonistJWH133inhibitedAβ1-42-inducedhippocampalneuronapoptosisCB2Ragonist,JWH133protectedhippocampalneuronsagainsttheAβ1-42-inducedLDHenhancementinhippocampalneuronalcultures.Inrepetitivefourexperiments,culturemediumLDHlevelsweremeasuredin4experimentalgroups,control,Aβ,Aβ+JWH133,Aβ+AM630+JWH133groups.Comparedtocontrol,theAβ1-42chronictreatmentincreasedLDHlevel,andAβ+JWH133preventedtheLDHelevation,whileAM630abolishedJWH133’seffects.Datarepresentsthemean±S.E.Mof4independentexperiments（**P<0.01；##P<0.01；^^P<0.01）4.JWH133对Aβ1-42诱导的凋亡模型中线粒体膜电位的影响线粒体膜电位△Ψm是能够反映线粒体功能是否正常的关键指标，是线粒体进行氧化磷酸化、产生三磷酸腺苷的基础，△Ψm一旦发生异常，这表明细胞线粒体功能发生障碍，使用流式细胞术检测Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡模型中△Ψm的变化以及加入JWH133后是否能够抑制该变化。结果显示，与对照组相比，Aβ组的△Ψm明显下降(P<0.01），Aβ+JWH133组与Aβ1-42组相比(P<0.01），Ψm明显上升。Aβ+AM630+JWH133组与Aβ+JWH133组相比，△Ψm明显下降（P<0.01）,差别具有统计学意义（图4）。
【参考文献】：
博士论文
[1]调控CB2R-PI3K/AKT通路对幼年癫痫大鼠星形胶质细胞保护作用的机制研究[D]. 曹庆隽.中国医科大学 2018
本文编号：3121799
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
β1-42处理7天诱导海马神经元凋亡Fig.1ChronicAβ1-42Aβ1-42treatmentfor7daysinducedapoptosisofhippocampalneuronsFlowcytometermeasurementsshowedachangeofcellsurvivalrateincontrol(A)andAβ1-42-treated(B)
青岛大学硕士学位论文162.慢性Aβ1-42处理诱导凋亡模型中CB2R的mRNA的变化为了检测CB2R在Aβ1-42处理的模型中的表达是否增加，我们使用qRT-PCR技术检测了海马神经元中CB2R的mRNA表达。结果显示，与对照组（无Aβ1-42处理）比较，在Aβ1-42处理的作用下，CB2R的mRNA表达明显增加，差异具有统计学意义（P<0.001）。表明CB2R在Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡中可能起到某些作用（图2）。图2，Aβ1-42诱导的海马神经元中CB2R的mRNA表达Fig2.TheexpressionofCB2RmRNAinhippocampalneuronsTheexpressionofCB2RmRNAinAβgroupwasincreasedsignificantlycomparedwithControlgroup.Datarepresentsthemean±S.E.Mof4independentexperiments（***P<0.001）3.JWH133对Aβ1-42诱导的凋亡模型的作用乳酸脱氢酶（LDH）在细胞膜受损时，会释放到细胞外，由于该酶的性质比较稳定，可以检测培养液中的LDH的含量作为确定细胞受损死亡指标。为了探讨CB2R选择性激动剂JWH133在Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡中是否起作用，我们设计了4个分组进行实验：对照组（不作任何处理），Aβ组，Aβ+JWH133组，Aβ+AM630（CB2R抑制剂）+JWH133组，所有实验组均使用Aβ处理7天，之后使用LDH试剂盒检测细胞损伤率。结果显示，Aβ组与对照组相比，细胞凋亡率明显增高(P<0.01)；使用JWH133（10μM）提前50min预处理细胞后再进行Aβ1-42处理。结果表明，Aβ+JWH133组的细胞凋亡率相比于Aβ组明显降低，差别具有统计学意义（P<0.01）；而加入CB2R受体阻断剂AM630抑制CB2R的激活后，JWH133的保护作用消失，细胞死亡率又明显升高，差异具有统计学意义（P<0.01）。结果表明，CB2R激动剂JWH133激活CB2R后可以抑制Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡（图3）。
结果17图3.CB2R激动剂JWH133抑制Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡Fig3.CB2RagonistJWH133inhibitedAβ1-42-inducedhippocampalneuronapoptosisCB2Ragonist,JWH133protectedhippocampalneuronsagainsttheAβ1-42-inducedLDHenhancementinhippocampalneuronalcultures.Inrepetitivefourexperiments,culturemediumLDHlevelsweremeasuredin4experimentalgroups,control,Aβ,Aβ+JWH133,Aβ+AM630+JWH133groups.Comparedtocontrol,theAβ1-42chronictreatmentincreasedLDHlevel,andAβ+JWH133preventedtheLDHelevation,whileAM630abolishedJWH133’seffects.Datarepresentsthemean±S.E.Mof4independentexperiments（**P<0.01；##P<0.01；^^P<0.01）4.JWH133对Aβ1-42诱导的凋亡模型中线粒体膜电位的影响线粒体膜电位△Ψm是能够反映线粒体功能是否正常的关键指标，是线粒体进行氧化磷酸化、产生三磷酸腺苷的基础，△Ψm一旦发生异常，这表明细胞线粒体功能发生障碍，使用流式细胞术检测Aβ1-42诱导的海马神经元凋亡模型中△Ψm的变化以及加入JWH133后是否能够抑制该变化。结果显示，与对照组相比，Aβ组的△Ψm明显下降(P<0.01），Aβ+JWH133组与Aβ1-42组相比(P<0.01），Ψm明显上升。Aβ+AM630+JWH133组与Aβ+JWH133组相比，△Ψm明显下降（P<0.01）,差别具有统计学意义（图4）。
【参考文献】：
博士论文
[1]调控CB2R-PI3K/AKT通路对幼年癫痫大鼠星形胶质细胞保护作用的机制研究[D]. 曹庆隽.中国医科大学 2018
本文编号：3121799
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