TREM2影响小胶质细胞迁移参与AD发病机制探讨

发布时间：2021-04-23 19:49

　　髓样细胞触发性受体-2（Triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）在大脑内主要表达于小胶质细胞表面。TREM2的突变能够增加阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）和其他神经退行性疾病的患病风险。最近研究报道TREM2缺失的AD模型鼠中淀粉样斑块周围的小胶质细胞显著减少,但其潜在机制仍待阐明。在本研究中,我们首先对野生型（Wildtype,WT）小鼠和Trem2基因敲除（Trem2-/-,knockout,KO）小鼠进行脑部机械损伤,通过免疫组化和免疫荧光技术证实了 TREM2缺失的小胶质细胞向脑损伤部位募集功能受损。进一步在原代小胶质细胞中,电转小干扰RNA（siRNA）将Trem2的水平敲低,采用Transwell实验证实了Trem 敲低后小胶质细胞的迁移能力显著减弱。随后的机制分析中我们发现,TREM2缺失时与细胞迁移密切相关的粘着斑激酶（Focal adhesion kinase,FAK）的磷酸化及其下游的小G蛋白Rac1/Cdc42的活化水平显著下调。进而用淀粉样蛋白Aβ42寡聚体（Oli... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 阿尔茨海默病
        1.1.1 阿尔茨海默病概述
        1.1.2 阿尔茨海默病的病理学特征
            1.1.2.1 淀粉样斑
            1.1.2.2 神经纤维缠结
        1.1.3 阿尔茨海默病的遗传因素
        1.1.4 阿尔茨海默病中的神经炎症
    1.2 小胶质细胞与AD
        1.2.1 小胶质细胞的来源和功能
        1.2.2 小胶质细胞在AD疾病进程中的作用
    1.3 TREM2与AD
        1.3.1 TREM2蛋白概述
        1.3.2 TREM2与AD
    1.4 小胶质细胞的迁移
    1.5 本论文的研究内容与研究意义
第二章 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 细胞和siRNA
        2.1.3 培养液、抗体及其他试剂
    2.2 主要溶液的配制
        2.2.1 基因型鉴定相关溶液及配制
        2.2.2 细胞培养液及配制
        2.2.3 蛋白样品制备溶液及配制
        2.2.4 SDS-PAGE凝胶溶液及制备
        2.2.5 蛋白免疫印迹（Western blotting）溶液及配制
        2.2.6 免疫组化,免疫荧光所需溶液及配制
    2.3 主要仪器设备
    2.4 实验方法
        2.4.1 小鼠基因型鉴定
        2.4.2 小鼠脑立体定位
        2.4.3 免疫组化
        2.4.4 细胞培养
        2.4.5 基因敲减
        2.4.6 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）
        2.4.7 蛋白免疫印记
        2.4.8 免疫荧光实验
        2.4.9 细胞迁移实验
        2.4.10 GLISA检测
        2.4.11 数据统计
第三章 实验结果与分析
    3.1 TREM2敲除的小胶质细胞在大脑损伤部位聚集减少
    3.2 TREM2促进小胶质细胞的迁移能力
    3.3 TREM2缺失的小胶质细胞对细胞外基质的降解减弱
    3.4 TREM2调控FAK/Rac1/Cdc42信号通路
    3.5 Aβ依赖TREM2激活FAK/Rac1/Cdc42信号通路
    3.6 激活FAK/Rac1/Cdc42通路增加TREM2缺失的小胶质细胞向Aβ的迁移
第四章 实验总结与讨论
参考文献
致谢
论文投递、发表状况



本文编号：3155931