遗传性脆性X综合征的细胞与分子遗传学检测

发布时间：2021-06-10 19:36

　　目的脆性X综合征（Fragile X Syndrome, FXS）是仅次于唐氏综合征的发病率较高的一种遗传性智力低下疾病,为不完全显性X连锁遗传病,其发病机制是因为脱氧三核苷酸串联重复拷贝数大大增加所致,主要表现为智力低下。由于在青春期前儿童的临床表现无特异性,主要依据实验室诊断。目前常用的实验室诊断方法都有不足之处,本研究希望建立一套准确、快速、廉价的实验室检测FXS的方法。方法采用细胞遗传学与分子遗传学相结合的方法。细胞遗传学方法:首先对130例样本的外周血淋巴细胞进行培养,通过加入5-Fdu诱导脆性位点的表达,每个样本镜下分析100个中期细胞,计数X染色体脆性位点的表达情况,脆性位点表达率≥4%为阳性;PCR结合甲基化特异性PCR（MS-PCR）的分子遗传学方法:对上述130例样本的外周血提取基因组DNA,首先对所有男性和女性样本都进行常规PCR扩增FMRⅠ基因（CGG）n重复序列,对不能有效扩增的男性样本和所有女性样本再进行MS-PCR,用亚硫酸氢钠对基因组DNA进行修饰,非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,以修饰后的DNA为模板,用两套不同的引物对（甲基化... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

FRAXA在X染色体中的位置

甚至可达上千次，这种类型称为全突变（ full mutation）。全突变经常伴随(CGG)n 重复区和 FMRI 启动子区的高度甲基化[ 3 ]。另一种情况为 FXS 患者从其母亲处继承了异常的 FMRI 等位基因，他们的母亲或者是携带了相似的异常重复（但是由于 X 染色体的随机失活而没有表现异常表型），或者其 FMRI 等位基因仅是过渡形式，这种类型更常见，称为前突变（premutation），前突变的（CGG)n 重复为 53-230个之间，小的前突变没有异常的甲基化。FMRⅠ基因型和表型之间的关系见表 1。

A 的表达≥4 为阳性），见图 3-5。623423731 01020304050607080901001101201300% 1% 2% 3% 4% 5% 脆性位点率样个数本图 3 不同脆性位点率的样本个数Fig.3 number of sample with different frigile site ratio

【参考文献】：
期刊论文
[1]全血基因组DNA 3种提取方法的比较[J]. 胡婧,袁媛,陈思礼.  中南民族大学学报(自然科学版). 2008(02)
[2]秦巴山区儿童FRAXE脆性位点CGG重复多态性分布及与智力的相关性分析[J]. 牛银波,南亚萍,舒青,张科进,高晓彩,张富昌.  遗传. 2006(10)
[3]脆性X染色体综合征快速筛查的聚合酶链反应技术[J]. 李东至,廖灿,黄以宁.  中国生育健康杂志. 2005(01)
[4]脆性X综合征的基因诊断与产前诊断[J]. 邬玲仟,潘乾,龙志高,朱俊真,戴和平,郑多,夏昆,黄幸青,夏家辉.  遗传. 2003(02)
[5]DNA甲基化在基因表达调控中的作用[J]. 潘泽民.  国外医学.临床生物化学与检验学分册. 2001(06)
[6]用简化的六项标准筛查脆性X综合征[J]. 郭异珍,柴精华,姚丹,张苏萍,黄尚志,赵时敏.  中国医学科学院学报. 2000(01)
[7]A Rapid Screening and Diagnosis on Fragile X Syndrome by PCR[J]. 陈敬春,杨爱德,费洪宝,金润铭,何美娟,王碧玉.  Journal of Tongji Medical University. 1999(02)
[8]用RT-PCR技术分析脆性X男性患者的FMR-1基因的表达[J]. 朱文革,李牧尧,赵荣枝.  中华医学遗传学杂志. 1998(01)



本文编号：3222996