新型壳聚糖-Trolox纳米颗粒对于过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞氧化应激损伤的保护作用与机制研究

发布时间：2021-07-09 01:22

　　阿尔兹海默症（Alzheimer Diseases,AD）是最普遍的神经退行性疾病,病理学特点主要是细胞外由β-淀粉样蛋白（Aβ）寡聚物沉积斑及Tau蛋白神经纤维缠结以及记忆衰退。虽然导致AD神经元死亡的基本生化和分子机制尚未明确,但是氧化应激与AD的发病机制密切相关。纳米材料作为新型载体材料,具有无毒、粒径小、无免疫原性等优势,可以负载小分子药物突破血脑屏障治疗AD等神经损伤疾病。鉴于此,我们以安全无毒的壳聚糖为原料,将其负载水溶性维生素E类似物Trolox形成壳聚糖-Trolox纳米颗粒（CS-Trolox NPs）。我们以H₂O₂诱导稳定转染人早老素突变体APPsw质粒的SH-SY5Y细胞株建立AD细胞模型,探讨上述CS-Trolox NPs对神经细胞氧化应激损伤的保护效果及相关机制,具体结果如下:1.CS-Trolox NPs的制备、表征和生物相容性利用H₂O₂及机械超声的方法,将大分子CS氧化降解为小分子量CS,加入环氧乙烷对其进行羟乙基化修饰,通过自组装得到水溶性壳聚糖纳米颗粒,并通过疏... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 自由基生物医学与抗氧化剂研究进展
        1.1.1 活性氧
        1.1.2 活性氧的产生来源
        1.1.3 活性氧对机体产生的损伤
        1.1.4 活性氧的清除机制
        1.1.5 抗氧化剂及其作用机理
    1.2 阿尔兹海默症的研究进展
        1.2.1 阿尔兹海默症概述
        1.2.2 APP蛋白与Aβ
        1.2.3 AD的发病机制
    1.3 纳米颗粒作为药物载体的研究进展
        1.3.1 纳米技术概述
        1.3.2 壳聚糖概述
        1.3.3 壳聚糖纳米颗粒的制备方法
        1.3.4 壳聚糖的生物降解性
        1.3.5 壳聚糖的毒性
        1.3.6 壳聚糖纳米颗粒作为药物载体的研究
第2章 研究内容
    2.1 引言
    2.2 实验材料、试剂与仪器
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 CS-Trolox NPs的制备
        2.3.2 细胞培养和氧化应激模型的建立
        2.3.3 细胞存活率的测定方法
        2.3.4 细胞对CS-Trolox NPs摄取的测定方法
        2.3.5 细胞内ROS水平的测定方法
        2.3.6 细胞分泌Aβ_(1-40)的测定方法
        2.3.7 细胞凋亡的测定方法
        2.3.8 细胞相关蛋白表达的测定方法
        2.3.9 数据统计分析
第3章 实验结果
    3.1 CS-Trolox NPs的化学表征
        3.1.1 CS-Trolox NPs的制备流程
        3.1.2 CS NPs的透射电镜（TEM）照片
        3.1.3 CS-Trolox NPs的动态光散射检测
        3.1.4 CS-Trolox NPs的紫外表征
    3.2 CS纳米载体的细胞毒性
    3.3 神经细胞氧化应激损伤模型的建立
        3.3.1 实验细胞的确定
        3.3.2 H_2O_2浓度的选择
        3.3.3 氧化应激损伤后细胞的自行修复
    3.4 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞存活率的影响
    3.5 细胞对CS-Trolox NPs的摄取效果
    3.6 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞内ROS水平的影响
    3.7 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞分泌Aβ1-40的影响
    3.8 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞凋亡的影响
        3.8.1 形态学观察
        3.8.2 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞线粒体膜电位的影响
    3.9 CS-Trolox NPs对H_2O_2诱导损伤细胞凋亡通路的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3272720