精神分裂症易感基因DGCR2突变体P429R功能研究

发布时间：2021-07-11 01:51

　　人染色体22q11.2区域缺失引起一系列发育障碍,其中约有23%⁴3%的病人患有精神分裂症（SCZ）。SCZ易感基因DGCR2（DiGeorge syndrome critical region gene2）位于缺失区域,在SCZ病人脑中表达降低。最近有研究对SCZ病人外显子测序表明DGCR2基因上一新生（de novo）错义突变（P429R）与SCZ相关,但P429R突变对DGCR2功能的影响以及与SCZ之间的关系并不清楚。为此,我们利用聚合酶链式反应（PCR）定点突变的方法构建了DGCR2-P429R突变体的真核细胞表达载体。在细胞系中过表达P429R突变体,通过免疫印迹（Immunoblotting,IB）发现其水平与野生型（WT）的DGCR2相当;但P429R在蛋白质电泳中的迁移速率变快,其相对分子量比WT小8 kDa（kilo-Dalton）左右。进一步,在原代培养海马神经元中表达P429R突变体,通过免疫细胞化学（Immunocytochemistry,ICC）发现其在神经元的分布与WT一致。DGCR2是一种主要分布在突触后致密（PSD）的单次跨膜蛋白... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

2q11DS的小鼠模型

第一章 前言factor typeC repeat）位于DGCR2的胞外段（extracellular domain, ECD），紧接着是跨膜区（transmembrane, TM）和胞内段（intracellular domain, ICD）。在DGCR2的ICD并无明显的结构域，但我们对其序列进行生物信息学分析发现其中最靠近C端的三个氨基酸TVV是结合含有PDZ-domain蛋白的结构域。在中枢神经系统中，很多PDZ蛋白在突触，尤其是突触后致密（postsynaptic densities, PSDs）的部位发挥重要作用，如PSD-95[13]。DGCR2的ICD尾端含有该结构域提示DGCR2有可能定位在突触后膜上，同PSD-95结合。本研究利用免疫共沉淀发现DGCR2通过其C末端的TVV三个氨基酸与PSD-95结合。

第三章 实验结果第三章 实验结果3.1 DGCR2 在小鼠脑中的表达为了探索 DGCR2 的功能，我们首先利用抗 DGC小鼠各种不同组织中的表达情况。如图 3.1A 所示，D肝脏以及脾脏中表达较高。DGCR2 是精神分裂症易感它在不同脑区的表达，发现 DGCR2 在皮层、海马、状体等脑区均有较高的表达（图 3.1B）。我们还收集至出生后 50 天（P50）的小鼠脑组织裂解液，检测了的表达，发现 DGCR2 从 E12.5 开始表达，P5-P21 表达3.1C）。P5-P21 是神经元突起以及突触发育的重要时期经元突起和突触发育中发挥重要作用。BA


本文编号：3277089