脑胆碱能Gab1功能缺失介导认知功能障碍分子机制及调控研究

发布时间：2021-07-18 19:39

　　研究背景:中枢胆碱能神经系统分布广泛,参与调节包括学习记忆、清醒睡眠、注意力和压力反应在内的多种生理过程。胆碱能神经系统的功能异常,包括神经元数量的丢失和突触传递功能的降低,已被报道在认知功能障碍相关疾病的病理过程中发挥重要作用,比如胆碱能损伤假说是阿尔茨海默症病因的重要假说之一。但胆碱能系统功能异常导致认知障碍过程复杂,具体机制尚未完全阐明。Grb2-associated binding protein 1（Gab 1）,属于接头蛋白 Gab家族的一员。在其上游的受体酪氨酸激酶激活后,Gab1会被招募至细胞膜上,被磷酸化后作为锚定分子,通过级联反应将胞外信号传递到胞内。因此Gab1参与细胞生长、细胞极化、机体发育、免疫调节等生理过程,但是其在中枢神经系统的功能尚未见报道。我们前期研究初步发现,中枢神经系统Gab1特异性表达在中枢胆碱能神经元上。由此,深入探究胆碱能神经元Gab1蛋白在中枢神经系统的功能,有望进一步认识胆碱能神经系统在调控认知功能中的作用,为认知功能障碍疾病的药物开发提供新的候选靶标。本课题的研究内容主要包含以下3个部分:1.Gab1在大脑的表达分布及其与阿尔茨海默症的... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：128 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同种属的Gabl氮基酸序列比对及小鼠源Gabl蛋白活性结构域和潜在的氛基故修饰位点示意图

绿色信号共叠加为黄色信号。同时，Ｇａｂｌ阳性表达的细胞也与乙酰胆减神经元的??另一种标记蛋白囊泡乙酰胆碱转运体蛋白（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ?Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ?Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ，??ｖＡｃｈＴ）共定位（图１－２?Ｂ）。此外，利用胆碱能神经元绿色荧光标记的转基因小鼠??（Ｃ／＾７＾Ｃ；ｆＰｍｉｃｅ）的脑切片，进行Ｇａｂｌ免疫染色，发现大部分Ｇａｂｌ阳性表达??的细胞，是表达绿色荧光蛋白的胆碱能神经元（图１－２Ｃ）。??Ｕ??

包括内侧隔核（ＭＳ）、纹状体（Ｓｔｒｉａｔｕｍ，?ＳＴＲ）和皮层（Ｃｏｒｔｅｘ，?ＣＴＸ），利??用Ｇａｂｌ抗体和胆碱能神经元标记物ＣｈＡＴ进行免疫荧光双染实验，并且对Ｇａｂｌ??和ＣｈＡＴ共表达的情况进行定量统计（图１－３?Ａ，?Ｂ）。结果提示：在内侧隔核区，??Ｇａｂｌ阳染的细胞中９３．３１?±?３．１１％是ＣｈＡＴ阳染的胆碱能神经元，在纹状体的比??例是９１．２０?±?０．６７％，在皮层的比例是９７．３０?土?０．７１％；反之，在内侧隔核区ＣｈＡＴ??阳染的胆碱能神经元中８３．４６?±?１．５３％表达Ｇａｂｌ，在纹状体该比例是５４．７３?土??７．７５％，在皮层是９２．９?±?１．０５％。共定位的定量结果提示，在内侧隔核、纹状体??及皮层区域，Ｇａｂｌ特异性地表达在中枢神经系统胆碱能神经元上，在内侧隔核及??皮层区域的绝大多数胆碱能神经元也均表达Ｇａｂｌ蛋白（图１－３Ｂ）。??此外，我们也对内侧隔核、纹状体和皮层三个脑区内，单位面积上Ｇａｂｌ阳性??表达的细胞密度进行统计，发现在内侧隔核区Ｇａｂｌ阳染的细胞密度（１５９．００?士??１５．２７?ｐｅｒ?ｍｍ２）

【参考文献】：
期刊论文
[1]Impairment of the nerve growth factor pathway driving amyloid accumulation in cholinergic neurons the incipit of the Alzheimer’s disease story?[J]. Viviana Triaca,Pietro Calissano.  Neural Regeneration Research. 2016(10)



本文编号：3290232