自噬和Rab9在APPswe/PS1dE9双转基因小鼠神经元变性中的作用

发布时间：2021-08-04 21:42

　　目的以APPswe/PS1dE9双转基因小鼠为对象，研究Rab9及自噬在阿尔茨海默病神经元变性过程中的作用。方法1.采用PCR技术对小鼠基因型进行鉴定。2.通过旷场实验和新颖物体探索实验分别对6月龄和12月龄Tg APPswe/PS1dE9转基因小鼠和同龄同性别野生型小鼠进行自主探索活动和情感变化的检测。3.采用免疫组化和免疫荧光技术分别对12月龄Tg APPswe/PS1dE9转基因小鼠和野生型两组小鼠脑组织中Aβ116、LC3B、Rab9和Vimentin的表达进行检测。4.采用免疫荧光技术对12月龄的Tg APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑组织进行vimentin和硫磺素S双重标记以显示老年斑与vimentin阳性细胞的空间位置关系。5.采用Western Blot技术分别对12月龄Tg APPswe/PS1dE9转基因小鼠和野生型小鼠脑组织中LC3B Ⅰ、LC3B Ⅱ、Rab9和Vimentin蛋白进行定量检测。结果1．在旷场实验中，6月龄Tg APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的探索活性与对照组野生型小鼠相比无明显变化，且不存在焦虑倾向；12月龄时，Tg APPswe... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同年龄、性别的转基因小鼠和对照小鼠在旷场中的移动探索活性

A.不同年龄及性别总的运动距离；B.6 月龄雄鼠不同时间段的运动距离；C.6 月龄雌鼠不同时间的运动距离；D.12 月龄雄鼠不同时间段的运动距离。P<0.05 有统计学差异，数据均以均数±S表示。2.2小鼠的焦虑程度小鼠对中心区域的探索情况（在中心区域的运动距离、进入中心区域的频率、心区域的探索时间）可反映小鼠的焦虑程度，即在中心区域活动越多，表明小鼠越有冒险性，趋避性和焦虑程度越低[17]。6 月龄的 Tg 小鼠对中心区域的探索情况与照组无明显差异（图 3A，3B，P>0.05）；12 月龄时，雄性 Tg 小鼠在中心区域的运距离和进入中心区域的频率明显少于对照组（图 3A，P＝0.0285；图 3B，P=0.024但对中心区域的探索时间与对照组无显著差异（图 3C，P>0.05），12 月龄雄性 Tg鼠可能存在焦虑倾向。图 3：

×200 ×200示 12 月龄 Tg APPswe/PS1dE9 小鼠及与同窝同龄野生型小鼠脑内老年斑分布及形态。同基因型小鼠 6E10 的免疫荧光染色（×40，×400）；（B）示不同基因型小鼠皮层 6E1染色（×200）12月龄不同基因型小鼠 LC3B 染色结果细胞内 LC3B 主要分布在自噬小体膜的表面，成为自噬小体特异性的标记物


本文编号：3322459