核蛋白SET丝氨酸9位点模拟磷酸化对PP2A的抑制作用

发布时间：2021-08-21 05:05

　　背景:阿尔茨海默病（Alzheimers Disease,AD）是最常见的神经退行性疾病之一,神经原纤维缠结和老年斑是其主要的病理学特征性改变。核蛋白SET/I2PP2A是丝氨酸/苏氨酸磷酸酶PP2A的内源性抑制剂,主要分布在细胞核中,在细胞质中分布很少;胞浆PP2A活性下调是阿尔茨海默病（AD）发病最为关键的原因也被认可,但SET自核转运至胞浆的具体过程及其对PP2A活性影响的具体机制尚不清楚。方法:通过基因定点突变SET Ser-9为丙氨酸（相关位点不能被磷酸化）模拟SET的非磷酸化状态（npSET）,将Ser-9突变为谷氨酸（利用其PO4基团的负电荷效应而更易磷酸化）模拟SET的磷酸化状态（pSET）,构建npSET和pSET两个质粒。在细胞水平用Lipofectamine2000在HEK293/tau细胞转染分别转染pcDNA3.1,wtSET,npSET和pSET四个质粒.在转染后24 h,48 h和72 h后,使用CCK-8检测细胞活力;使用丝氨酸/苏氨酸磷酸酶试剂盒测定PP2A活性;分别用western blotting（WB）和免疫荧光技术检测来检测tau蛋白过度磷酸化... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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英文缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
结果
讨论
小结
创新点
待研究的问题
参考文献
综述
    参考文献
致谢
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]GTPase Ran及其生物学作用[J]. 曹允考,张贵学,陈大元,孙青原.  细胞生物学杂志. 2004(03)



本文编号：3354934