MSCs移植对AD大鼠海马突触素蛋白表达的影响及补脑Ⅰ号干预作用

发布时间：2017-05-02 11:08

  本文关键词：MSCs移植对AD大鼠海马突触素蛋白表达的影响及补脑Ⅰ号干预作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 观察骨髓间充质干细胞移植及补脑Ⅰ号方的使用对AD模型大鼠学习记忆能力和空间定向力的改善作用,检测AD模型大鼠海马组织SOD活性、MDA含量及Ach含量、AchE活性,并通过Western blotting检测SYP蛋白表达,观察以上指标数值变化,并对MSCs移植及补脑Ⅰ号的干预作用进行探讨和分析。 方法 将80只清洁级雄性SD大鼠,经水迷宫筛选反应迅速、活跃的大鼠随机分为假手术组、模型组、模型+MSCs组、模型+中药+MSCs组4组,每组20只。将4组合格大鼠采用D-半乳糖溶液腹腔注射和三氯化铝溶液灌胃,连续造模6周。证实造模成功7天后开始进行细胞移植。移植成功2小时后开始灌注补脑Ⅰ号浓缩药物,每日2次,连续4周。治疗结束后检测大鼠学习记忆、空间定向能力,脑组织SOD活性、MDA的含量及Ach含量、AchE活性,并通过Western blotting检测SYP蛋白表达。 结果 模型组与假手术组相比较,Morris水迷宫测试中潜伏期、总游程以及穿越平台次数均显示出极显著差异(PO.01)；海马组织SOD活性、MDA的含量及Ach含量、AchE活性检测均显示出极显著差异(P0.01); SYP蛋白表达也具有极显著差异(P0.01)。模型+MSCs组、模型+中药+MSCs组大鼠潜伏期及总游程缩短、穿越平台位置次数增多,较模型组有显著统计学意义(P0.01～P0.05)。模型+中药+MSCs组可降低脂质过氧化物(MDA)的含量,提高脑组织自由基清除剂(SOD)的含量,与模型组比较具有极显著性差异(PO.01),与假手术组比较无差异(P0.05)。模型+MSCs组提高了SOD活性,与模型组比较具有极显著统计学意义(PO.01),与假手术比较也有显著统计学意义(P0.05)。模型+中药+MSCs组、模型+MSCs组均可降低乙酰胆碱酯酶的活性,模型+中药+MSCs组与模型组比较具有极显著差异(P0.01),模型+MSCs组与模型组比较具有显著差异(P0.05), AchE活性与Ach含量检测结果相反。模型+MSCs组与模型+中药+MSCs组均可增加SYP蛋白的表达,模型+MSCs组与模型组比较具有显著性差异(PO.05),模型+中药+MSCs组与模型组比较具有极显著性差异(P0.01)。 结论 1.模型+MSCs组与模型组比较AD大鼠学习记忆能力得到明显改善,证明单纯的MSCs移植对该疾病有治疗作用。 2.补脑Ⅰ号方配合MSCs移植,对改善AD模型大鼠学习记忆能力疗效显著优于单纯MSCs移植组,骨髓间充质干细胞的移植及补脑Ⅰ号方的配合使用可显著改善AD大鼠学习记忆及空间定向能力；有增强自由基代谢,提高机体抗氧化的能力；有降低乙酰胆碱酯酶活性,减少乙酰胆碱水解,修复海马突触素蛋白损伤的功能。
【关键词】：骨髓间充质干细胞移植 老年性痴呆 补脑Ⅰ号 突触素蛋白的表达
【学位授予单位】：贵阳中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.16
【目录】：

• 中文摘要8-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-14
• 第一部分 大鼠骨髓间充质干细胞的分离、扩增及鉴定14-20
• 1 实验材料14-15
• 1.1 实验动物14
• 1.2 主要仪器14
• 1.3 主要器械14
• 1.4 主要试剂14-15
• 1.5 主要试剂的配制15
• 2 方法15-17
• 2.1 大鼠MSCs的分离与培养15-16
• 2.2 大鼠MSCs的换液、传代及纯化16-17
• 2.3 大鼠MSCs的鉴定17
• 3 讨论17-20
• 3.1 影响MSCs生长的因素17-19
• 3.2 MSCs在疾病研究中的应用19
• 3.3 MSCs在老年性痴呆研究中的优势19-20
• 第二部分 MSCs移植对AD大鼠认知能力及空间定向能力影响的实验研究及补脑Ⅰ号的干预作用20-29
• 1 实验材料20
• 1.1 实验动物20
• 1.2 实验药物20
• 1.3 主要仪器20
• 2 方法20-22
• 2.1 实验动物分组20
• 2.2 SD大鼠造模前Morris水迷宫训练20-21
• 2.3 动物造模方法21
• 2.4 细胞移植及给药方法21-22
• 2.5 大鼠行为学检测22
• 2.6 统计学处理22
• 3 结果22-26
• 3.1 总游程结果22-24
• 3.2 平均潜伏期结果24-25
• 3.3 穿越原平台位置次数25-26
• 4 讨论26-29
• 4.1 D-半乳糖、ALCL3致老年性痴呆的作用机制26-27
• 4.2 Morris水迷宫在AD大鼠学习记忆能力中的运用27
• 4.3 中药对AD大鼠学习记忆能力的作用特点27-29
• 第三部分 MSCs移植对AD大鼠海马组织SOD活性、MDA含量的影响及补脑Ⅰ号的干预作用29-34
• 1 实验材料29-30
• 1.1 实验动物29
• 1.2 实验试剂29-30
• 1.3 实验仪器30
• 2 方法30-31
• 2.1 实验动物分组30
• 2.2 实验动物造模方法30
• 2.3 细胞移植方法30
• 2.4 给药方法30
• 2.5 检测方法30-31
• 2.6 统计学处理31
• 3 结果31-33
• 3.1 SOD活性检测结果31-32
• 3.2 MDA含量检测结果32-33
• 4 讨论33-34
• 4.1 SOD与老年性痴呆的关系33-34
• 4.2 MDA与老年性痴呆的关系34
• 第四部分 MSCs移植对AD大鼠海马Ach含量及AchE活性的影响及补脑Ⅰ号的干预作用34-40
• 1 实验材料34-35
• 1.1 实验动物34
• 1.2 实验试剂34-35
• 1.3 实验仪器35
• 2 方法35-37
• 2.1 实验动物分组35
• 2.2 实验动物造模方法35
• 2.3 细胞移植方法35
• 2.4 给药方法35
• 2.5 检测方法35-37
• 2.6 统计学处理37
• 3 结果37-38
• 3.1 AD大鼠海马Ach含量检测结果37
• 3.2 AD大鼠海马AchE活性结果37-38
• 4 讨论38-40
• 4.1 海马与学习记忆能力38-39
• 4.2 Ach及AchE与AD大鼠海马改变的相关性39-40
• 第五部分 MSCs移植对AD大鼠SYP蛋白表达影响的实验研究及补脑Ⅰ号的干预作用40-47
• 1 实验材料40-41
• 1.1 实验动物40
• 1.2 实验试剂40-41
• 1.3 实验仪器41
• 2 方法41-44
• 2.1 实验动物分组41
• 2.2 实验动物造模方法41
• 2.3 细胞移植方法41
• 2.4 给药方法41
• 2.5 检测方法41-44
• 2.6 统计学处理44
• 3 结果44-45
• 4 讨论45-47
• 全文总结与展望47-50
• 1 全文总结47-48
• 2 不足与展望48-50
• 参考文献50-54
• 附录一：~.略语表54-55
• 附录二：文献综述55-61
• 参考文献59-61
• 附录三：实验图片61-65
• 附录四：致谢65-66
• 附录五：个人简介66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：340828