精神分裂症中自噬和炎症相互作用及自噬mTOR调节通路与海马提取物的抗炎作用

发布时间：2021-10-15 10:09

　　精神分裂症是病因未明的重度精神障碍,临床症状包括幻觉、妄想、言语或行为紊乱,并伴有认知障碍等。免疫假说认为炎症能够引起精神分裂症发病。促炎因子在精神分裂症患者的血液和脑脊液中增加,而自噬功能基因如Beclin 1的mRNA水平的表达却降低。自噬通过先天免疫信号传导途径调节炎症,并能负向调节促炎因子的分泌。慢性炎症会引起自噬功能障碍引起白细胞介素-1?（IL-1?）过量分泌,进而刺激其他促炎因子的分泌。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是自噬过程的主要调节剂,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）途径是mTOR上游蛋白,并调节其活性。在精神分裂症中mTOR和PI3K表达均上调。但是精神分裂症中慢性炎症和自噬的相互关系,以及是否通过PI3K/mTOR信号途径调控自噬仍然是未知的。本课题首先检测精神分裂症患者的神经递质和炎症、自噬及自噬的调节通路指标的变化,然后检测炎症引发自噬和自噬抑制剂调控炎症小体的变化水平,探讨炎症和自噬在精神分裂症中的相互调控作用。基于炎症和自噬为靶点是抗精神分裂症药物的新方向和近年来海洋活性物质对免疫和大脑功能的调节作用,本课题探索了海洋药物线纹海马对脂多糖（LPS）诱导的... 

【文章来源】：广东海洋大学广东省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
1 绪论
    1.1 神经分裂症概述
    1.2 精神分裂症的假说
        1.2.1 精神分裂症的基因和环境因素假说
        1.2.2 精神分裂症的神经递质假说
        1.2.3 精神分裂症的炎症假说
        1.2.4 精神分裂症的自噬假说
    1.3 自噬通过炎症小体NLRP3调节炎症
    1.4 炎症对自噬的调控
    1.5 mTOR依赖的自噬溶酶体通路调节自噬
    1.6 海马的抗炎活性
    1.7 选题依据及研究内容
        1.7.1 选题依据
        1.7.2 研究内容
2 精神分裂症患者血浆中单胺类神经递质的变化
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 精神分裂患者和健康对照的筛选
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 仪器
    2.2 方法
        2.2.1 样本的处理及保存
        2.2.2 精神分裂症病人血浆中神经递质的提取
        2.2.3 统计方法
    2.3 结果与分析
    2.4 讨论与小结
        2.4.1 讨论
        2.4.2 小结
3 精神分裂症患者外周血淋巴细胞炎症和自噬-溶酶体相关标记物的变化特点及mTOR调节通路的改变
    3.1 材料与仪器
        3.1.1 精神分裂患者和健康对照的筛选
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 仪器
    3.2 方法
        3.2.1 样本的处理及保存
        3.2.2 MDC染色法检测淋巴细胞自噬发生率
        3.2.3 液相芯片系统检测血浆中的炎症因子
        3.2.4 荧光定量PCR检测淋巴细胞自噬和炎性因子的mRNA的表达
        3.2.5 Western Blot检测淋巴细胞自噬-溶酶体相关蛋白的含量
        3.2.6 数据统计分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 精神分裂症外周血浆中促炎细胞因子的变化
        3.3.2 精神分裂症外周血淋巴细胞中促炎细胞因子和自噬相关基因的变化
        3.3.3 精神分裂症外周血淋巴细胞MDC染色自噬发生率
        3.3.4 精神分裂症外周血淋巴细胞中自噬-溶酶体相关蛋白的变化
        3.3.5 精神分裂症外周血淋巴细胞中mTOR依赖的自噬-溶酶体调节通路的变化
    3.4 讨论与小结
        3.4.1 讨论
        3.4.2 小结
4 精神分裂症患者外周血淋巴细胞中炎症和自噬的相互影响
    4.1 材料与仪器
        4.1.1 精神分裂症患者的筛选
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 仪器
    4.2 方法
        4.2.1 精神分裂症患者样本的处理和保存
        4.2.2 加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤处理精神分裂症患者外周血淋巴细胞
        4.2.3 加入炎性因子IL-1b、IL-6和抗炎因子IL-10处理精神分裂症外周血淋巴细胞
        4.2.4 基因和蛋白的检测方法
        4.2.5 统计方法
    4.3 结果与分析
        4.3.1 精神分裂症外周血淋巴细胞NLRP3炎症小体的表达
        4.3.2 自噬抑制剂处理精神分裂症患者外周血淋巴细胞NLRP3及炎性因子IL-1b、IL-6的表达
        4.3.3 细胞因子处理精神分裂症患者外周血淋巴细胞后Beclin1及LC3B的表达
    4.4 讨论与小结
        4.4.1 讨论
        4.4.2 小结
5 线纹海马的抗炎作用
    5.1 材料与仪器
        5.1.1 材料
        5.1.2 仪器
    5.2 方法
        5.2.1 细胞培养
        5.2.2 CCK8法检测线纹海马乙醇提取物对BV2 细胞的增殖作用
        5.2.3 Griess法检测各组细胞释放的NO含量
        5.2.4 ELISA检测各组细胞释放的TNF-α、IL-1β和 IL-6含量
        5.2.5 细胞免疫荧光法检测各组细胞中CD68和Beclin1蛋白质的含量
        5.2.6 统计方法
    5.3 结果与分析
        5.3.1 线纹海马乙醇提取物对BV2细胞存活率的影响
        5.3.2 线纹海马乙醇提取物对LPS诱导的BV2细胞中炎症因子和氧自由基释放的影响
        5.3.3 线纹海马乙醇提取物对LPS诱导的BV2细胞的M1 极化的影响
        5.3.4 线纹海马乙醇提取物对LPS诱导的BV2细胞的自噬活性的影响
    5.4 讨论与小结
        5.4.1 讨论
        5.4.2 小结
6 总结与展望
    6.1 总结
    6.2 本研究的意义与创新点
    6.3 展望
参考文献
致谢
作者简介
导师简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]海马对慢性应激模型小鼠抑郁行为及神经递质含量的影响[J]. 李康伟,颜玲,张才,王昊印,张永平,宋采.  广东海洋大学学报. 2018(06)
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[5]外周血氧化应激因子、IL-6、S100-β、NT-3与精神分裂症症状的相关性研究[J]. 姚传斌,胡乃启,王志广,徐开侠.  国际精神病学杂志. 2018(02)
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博士论文
[1]小胶质细胞激活在精神分裂症阴性症状发病机制中作用的动物研究[D]. 朱芙蓉.中南大学 2014

硕士论文
[1]脂肪酸诱导的线粒体自噬功能缺陷介导NLRP3依赖性炎症反应机制的研究[D]. 夏春香.南京师范大学 2015



本文编号：3437879