可溶性Aβ25-35致原代培养大鼠皮层神经元毒性作用及机制研究

发布时间：2021-10-16 21:30

　　研究背景阿尔茨海默病（Alzheimer disease, AD）是一种严重的中枢神经系统退行性疾病,严重损害患者的认知功能,造成生活自理能力的障碍和精神行为的异常。统计结果显示,65岁以上老年人中有约10%,85岁以上老年人中有50%患有该病。目前,AD的病因学和发病机制尚不清楚。AD患者脑的典型病理特征为:老年斑的形成、神经元纤维缠结和神经细胞的大量死亡。通过近几年的研究发现,很多因素在AD的发病过程中起着至关重要的作用[1],特别是对淀粉样蛋白形成、沉积和毒性的研究发现β淀粉样蛋白（ amyloid beta protein, Aβ）及其聚集形成的老年斑（senile plaques, SPs ）是阿尔茨海默病特异性病理学变化,Aβ在脑实质内沉积,是阿尔茨海默病发病机制的重要环节[2]。现在Aβ已是公认的各种病因的共同通路,Aβ有不同的存在形式。已有大量研究显示,纤维状聚集的Aβ和寡聚态Aβ具有神经毒作用,在AD的形成和发展过程中起着核心和关键作用。对于形成聚集状态前可溶性Aβ神经毒性作用报道不一。本实验通过可溶性Aβ25-35致大鼠皮层神经元损伤作用来研究可溶性Aβ的神经毒性作... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

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原代培养7天的新生大鼠皮层神经元；B原代培养8天的新生大鼠皮层神经元（10

图 2 CCK-8 方法检测可溶性 Aβ25-35 对大鼠皮层神经元活力影响注：#加入可溶性 Aβ25-35 100nmol/L 后大鼠皮层神经元相对细胞活力与对照组相比有（P＜0.05）；##加入可溶性 Aβ25-35（1μmol/L、10μmol/L、30μmol/L）后大鼠皮层神经元相与对照组相比有统计学意义（P＜0.01） 。四、讨论CCK-8 检测法是一种新型、简便、客观的细胞活性检测方法，其该试剂中含有 WST-8，即[2-(2-甲氧基)-3-(4-硝基苯)-5-(2，4-二硫苯)-2钠盐]，它在电子载体 1-甲氧基-5 甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)被细胞线粒体中的乳酸脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜染料(dye)，所生成染料的量与活细胞活性成正比，从而进行简便而准确的细活性分析[19，20]，由于其对细胞无损伤，弃掉 CCK-8 作用液后还可以继胞。此方法在国外因其准确性、重复性远高于 MTT 等方法而被广泛应

组别 N 加 Aβ25-35 前 加 Aβ25-35 后Aβ25-35（10nmol/L） 12 291.36±8.54 292.18±9.69Aβ25-35（100nmol/L） 12 287.52±9.43 309.66±9.21#Aβ25-35（1μmol/L） 12 299.36±9.63 392.36±10.69*Aβ25-35（10μmol/L） 12 278.92±8.78 889.76±14.99*Aβ25-35（30μmol/L） 12 289.34±10.98 1068.32 士 15.43*注：#加入可溶性 Aβ25-35（100nmol/L 后大鼠皮层神经元细胞内 Ca2+紫外激发比值 R 较加入前升高有统计学意义（P＜0.05）；*加入可溶性 Aβ25-35（1μmol/L、10μmol/L、30μmol/L）后大鼠皮层神经元细胞内Ca2+紫外激发比值 R 较加入前升高有统计学意义（P＜0.01）。


本文编号：3440527