Aβ通过TREM2调节小胶质细胞功能的研究及TREM2靶点药物筛选

发布时间：2021-12-11 15:50

　　2 型髓系细胞触发受体（Triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）是一种先天免疫受体蛋白,其在中枢神经系统中主要由小胶质细胞表达。TREM2上的突变与阿尔兹海默症（Alzheimer’s Disease,AD）的发生密切相关,其中R47H突变能显著增加AD发生的风险。TREM2作为一个细胞表面受体,已经有多个TREM2配体被发现,包括磷脂（phospholipids）和载脂蛋白E（Apolipoprotein E,ApoE）。但是目前报道TREM2与AD相关配体的研究还很少,相关功能性配体尚有待于发现。在本研究中,我们利用真核细胞表达系统表达并纯化TREM2蛋白,结合蛋白固相结合（Solid Phase Binding）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）及表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）等技术,发现β-淀粉样蛋白寡聚体（Beta-Amyloid Oligomer,oAβ）能够特异性结合TREM2。为了进一步探究Aβ寡聚体与TREM2的相互作用是否能够... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图１－３脑中髓系细胞的标志基因，引自Ｑｉｎｇｙｕｎ?Ｌｉ和Ｂｅｎ?Ａ．?Ｂａｒｒｅｓ?（２０１７）??ＮＡＴＵＲＥ?ＲＥＶＩＥＷＳ?ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ??

产生ＩＬ－ｉｐ、ＴＮＦ－ａ和其他炎症因子，促进小胶质细胞的增殖。一方面可以通过??增加ＡＰ的吞噬减少ＡＰ的聚集；另一方面，长期的慢性澂活可以导致ＡＰ的吞??噬减少，引起神经毒性和神经元丢失（图１＿４）?［９１］。??８??

图３－２－２?Ｅｌ对ＴＲＥＭ２的信号通路及其功能的影响??Ｆｉｇ?３－２－２?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｅｌ?ｏｎ?ＴＲＥＭ２?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｆｕｎｃｔｉｏｎ??Ａ．?Ｅｌ对ＴＲＥＭ２－Ｋ０小胶质细胞的毒性更大。将ＷＴ和ＴＲＥＭ２－Ｋ０原代小胶质细胞以每孔５ｘ１０４??的密度，分别种植到９６孔板里。２４ｈ后，将不同浓度的Ｅ１分别与ＤＭＥＭ混合，加入孔中。１２ｈ后弃去??ＤＭＥＭ，加入含有细胞活力测试试剂的ＤＭＥＭ。ｌｈ后，使用＿标仪读取波长４９０ｎｍ处的吸光度。ｎ＝３，使??用ｔｗｏ－ｗａｙＡＮＯＶＡ进行分析，数据表示为平均值士ＳＤ，＊＊，ｐ＜０．０１。??Ｂ．?Ｅｌ不能激活ＴＤ４组细胞。将Ｅｌ与ＷＴ和ＴＤ４细胞混合，按照前述步骤测定吸光度。ＰＭＡ为激活??反应的放大剂，Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ为阳性对照，ｎ＝５，使用ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮ０ＶＡ进行分析，数据表示为平均值土?ＳＤ，ｎｓ，??ｎｏｔ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ。??Ｃ，Ｄ，?Ｅ．?Ｅｌ抑制小胶质细胞对ＡＰ的吞噬，且其对小胶质细胞吞噬功能的抑制率依赖于ＴＲＥＭ２。将??ＷＴ和ＴＲＥＭ２－ＫＯ原代小胶质细胞以每孔１ｘ１０６的密度，分别种植到１２孔板里。２４ｈ后弃去每孔的培养基，??分别加入含有ＩｐＭ?Ｅ１或对照溶剂的ＤＭＥＭ。１２ｈ后，弃去ＤＭＥＭ，加入含有２５０ｎＭＦＡＭ－Ａｐ的ＤＭＥＭ。??３ｈ，收取细胞，用于流式细胞术分析。ｎ＝３，使用ｔ－ｔｅｓｔ进行分析，数据表示为平均值士?ＳＤ。＊＊＊，ｐ＜０．００１，??


本文编号：3534952