Aβ（25-35）诱导PC12细胞损伤的蛋白质组学研究

发布时间：2021-12-25 05:44

　　本研究采用MTT及荧光染色法检测Aβ（25-35）对PC12细胞的毒性;首次采用差异凝胶电泳（DIGE）和质谱（MS）技术分析Aβ（25-35）引起的蛋白质组学改变。本研究,成功地建立了Aβ诱发PC12细胞损伤的符合国际标准的AD细胞模型,首次发现并鉴定了Aβ（25-35）诱导的PC12细胞中的早期蛋白质组学改变。质谱鉴定出7个蛋白。所鉴定的差异表达蛋白可分为3类:①具有分子伴侣活性的蛋白:葡萄糖调节蛋白75（glucose-regulated protein75,GRP75）、热休克同源蛋白71（heat shock cognate 71 kDa protein,HSC71）、calreticulin,这些蛋白的表达量均上调。②细胞骨架蛋白:β-微管蛋白（tubulin beta chain 15,TBETA-15）和低分子量神经细丝（neurofilament light polypeptide,NF-L）,它们的表达量亦上调。③与能量代谢有关的酶:肌酸激酶B （creatine kinase-B, CKB）和醛缩酶A（aldolase A）,这两种蛋白的表达量均下调。这7个蛋白可... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

β(25-35)对大鼠PC12细胞的毒性

存活率％ 66.54±3.29 72.44±4.56 84.73±4.27* 87.12±3.44*注：与未加雷沙吉兰的20μM Aβ(25-35)处理的对照组比较，*P<0.01。图2. 雷沙吉兰对20μM Aβ处理的PC12细胞活性的影响。雷沙吉兰各种终浓度（0, 0.1, 1, 10μM）预处理PC12细胞1小时后，加入20μM Aβ（25-35）共孵育48小时， MTT法检测细胞活性。每组为四复孔，重复四次实验。结果以均值±标准差表示，采用t检验，与未加雷沙吉兰的Aβ（25-35）处理的对照组比较， * p< 0.01。

10 3. 丫啶橙和溴化乙啶染色显示Aβ(25-35)诱导的PC12细胞凋亡及雷沙吉兰的防用。（A）对照组正常 PC12 细胞（箭头示），细胞膜完整，核染色质着绿色并呈正构。凋亡百分率为 2％。（B）20μMAβ(25-35)作用 24 小时的 PC12 细胞，早期凋胞（如箭头所示）核染色质着明亮绿色并呈固缩状或圆珠状。凋亡百分率为 6％C）20μM Aβ(25-35)作用 48 小时的 PC12 细胞，显示早期和晚期凋亡，晚期凋亡核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。凋亡百分率为 13％。（D）1μM 雷沙吉处理 PC12 细胞 1 小时后，再给予 20μM Aβ(25-35)共孵育 48 小时，凋亡细胞明显，箭头指示早期凋亡细胞。凋亡百分率为 5％。本实验中，于多个随机选择的视共计数 300 个细胞，每组实验重复 3 次，每次实验中相同条件设 4 个复孔。D 与比，差异显著(P<0.05)。×400。标尺：25 微米。


本文编号：3551894