环肽LVFFARK对淀粉样β蛋白聚集的抑制作用研究
发布时间：2022-01-17 17:03
阿尔兹海默氏症（Alzheimer’s disease,AD）是老年痴呆症的最主要发病形式,而β-淀粉样蛋白（amyloidβprotein,Aβ）的错误折叠和聚集是AD的重要诱因。因此,抑制Aβ聚集是一种有临床应用前景的阻止AD发生和治疗AD的策略。实验室在前期研究中,基于对Aβ全长序列氨基酸的分析,在Aβ17-21片段的基础上,设计了一种七肽抑制剂LVFFARK（LK7）。但是,虽然LK7在抑制Aβ的聚集上表现出一定的效果,但其易于自聚集,并且聚集体具有很强的细胞毒性,从而阻碍了其进一步开发和应用。因此,本研究针对LK的上述缺陷,提出将LK7通过首尾环化改造,设计得到环肽LK7（cLK7）,通过实验研究详细考察了其理化性质和对Aβ40聚集的抑制作用。研究结果发现,cLK7展现出明显不同于LK7的自聚集特性。LK7容易自聚集成细长的致密的纤维状聚集体,而cLK7则聚集成分散的小的球状颗粒。当利用SH-SY5Y和PC-12细胞株考察其对细胞的毒性上发现,cLK7几乎没有细胞毒性;同时,在抵御酶的降解方面,cLK7也比LK7展现了更高的稳定性。另外,结合作用热力学研究表明,在LK7和cL...
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AD致病基因出现的频率以及它们引发AD的风险高低图
图 1-2APP 的酶解过程图[44]Figure 1-2 Proteolytic processing of APP. (a) In an non-amyloidogenic pathwaycleavage occurs when α-secretase acts on APP to liberate APPsa and α-CTF, the latterbeing cleaved by γ-secretase to generate P3 and intracellular C-terminal fragment(AICD) (left). Amyloidogenic cleavage by β-secretase liberates APPsβ and theresidual peptide (β-CTF) is cleaved by γ-secretase to produce Aβ and AICD (right). (b)The schematic structure of APP is shown with the Aβ domain shaded in red andenlarged. The major sites of cleavage by α, β and γ-secretase are indicated along withAβ numbered from the N-terminal.在 Aβ 片段中，Aβ40 的含量最为丰富，约占总量的 90%-95%，其余的大部分为 Aβ42[45]。尽管 Aβ42 含量稍少，但其拥有更强的细胞毒性，并且相比于 Aβ40聚集更为迅速，在 AD 的发病过程中扮演着重要的角色[46]。在正常人的脑脊液（CSF）中，Aβ 的浓度大约为 1~2 nM。Mehta 等人使用 ELISA 分析，测定 Aβ40在 AD 患者脑脊液（CSF）中的浓度为 30 nM，Aβ42 为 8 pM，而 Ida 等人采用
第 1 章 文献综述地解释了 Cu2+更容易促进 Aβ42 聚集这一现象[55, 57]。Aβ 在从单体聚集成寡聚体然后到纤维的过程往往螯合金属离子（图 1-4），金属离子的螯合过程可能会稳定寡聚体状态，并且产生活性氧物质（reactiveoxygen species，ROS），给细胞带来氧化压力[58, 59]。Aβ 在与金属离子结合时，能够通过将两个电子传递给 O2来还原 Cu2+和 Fe3+，产生 H2O2，这一反应对于 Aβ-诱导的氧化压力以及细胞毒性至关重要[59, 60]，Met35 以及 Tyr10 能够部分调节此反应[61]。此外，在生物还原剂作为电子供体的存在下，Cu2+和 Fe3+结合到 Aβ 上能进一步催化 H2O2生成。最可能的电子供体是胆固醇和长链脂肪酸，这与 Aβ能够依附在细胞膜上，随后产生有毒的脂质氧化物质（羟固醇和 4-羟基壬烯酸[HNE]）相一致[62]。
【参考文献】：
博士论文
[1]多肽抑制剂的设计及其功能化的纳米粒子对淀粉样β蛋白聚集的抑制作用[D]. 熊能.天津大学 2015
本文编号：3595103
【文章来源】：天津大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AD致病基因出现的频率以及它们引发AD的风险高低图
图 1-2APP 的酶解过程图[44]Figure 1-2 Proteolytic processing of APP. (a) In an non-amyloidogenic pathwaycleavage occurs when α-secretase acts on APP to liberate APPsa and α-CTF, the latterbeing cleaved by γ-secretase to generate P3 and intracellular C-terminal fragment(AICD) (left). Amyloidogenic cleavage by β-secretase liberates APPsβ and theresidual peptide (β-CTF) is cleaved by γ-secretase to produce Aβ and AICD (right). (b)The schematic structure of APP is shown with the Aβ domain shaded in red andenlarged. The major sites of cleavage by α, β and γ-secretase are indicated along withAβ numbered from the N-terminal.在 Aβ 片段中，Aβ40 的含量最为丰富，约占总量的 90%-95%，其余的大部分为 Aβ42[45]。尽管 Aβ42 含量稍少，但其拥有更强的细胞毒性，并且相比于 Aβ40聚集更为迅速，在 AD 的发病过程中扮演着重要的角色[46]。在正常人的脑脊液（CSF）中，Aβ 的浓度大约为 1~2 nM。Mehta 等人使用 ELISA 分析，测定 Aβ40在 AD 患者脑脊液（CSF）中的浓度为 30 nM，Aβ42 为 8 pM，而 Ida 等人采用
第 1 章 文献综述地解释了 Cu2+更容易促进 Aβ42 聚集这一现象[55, 57]。Aβ 在从单体聚集成寡聚体然后到纤维的过程往往螯合金属离子（图 1-4），金属离子的螯合过程可能会稳定寡聚体状态，并且产生活性氧物质（reactiveoxygen species，ROS），给细胞带来氧化压力[58, 59]。Aβ 在与金属离子结合时，能够通过将两个电子传递给 O2来还原 Cu2+和 Fe3+，产生 H2O2，这一反应对于 Aβ-诱导的氧化压力以及细胞毒性至关重要[59, 60]，Met35 以及 Tyr10 能够部分调节此反应[61]。此外，在生物还原剂作为电子供体的存在下，Cu2+和 Fe3+结合到 Aβ 上能进一步催化 H2O2生成。最可能的电子供体是胆固醇和长链脂肪酸，这与 Aβ能够依附在细胞膜上，随后产生有毒的脂质氧化物质（羟固醇和 4-羟基壬烯酸[HNE]）相一致[62]。
【参考文献】：
博士论文
[1]多肽抑制剂的设计及其功能化的纳米粒子对淀粉样β蛋白聚集的抑制作用[D]. 熊能.天津大学 2015
本文编号：3595103
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jsb/3595103.html
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